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    黑色素瘤相關(guān)抗原E2/肝細(xì)胞癌相關(guān)蛋白3抗體免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟

    更新時(shí)間:2023-05-18點(diǎn)擊次數(shù):702

    黑色素瘤相關(guān)抗原E2/肝細(xì)胞癌相關(guān)蛋白3抗體免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:


    一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:


    磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。


    二、實(shí)驗(yàn)步驟


    1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。


    2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。


    3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。


    4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。


    5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。

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