<rt id="iwqcm"></rt>
  • <button id="iwqcm"></button>
    <code id="iwqcm"></code>
  • <li id="iwqcm"><dl id="iwqcm"></dl></li>
    <abbr id="iwqcm"><source id="iwqcm"></source></abbr>
  • <rt id="iwqcm"></rt>
    <li id="iwqcm"></li>
    <code id="iwqcm"><tr id="iwqcm"></tr></code>
    <button id="iwqcm"><source id="iwqcm"></source></button>
  • 歡迎進(jìn)入上海聯(lián)祖生物科技有限公司網(wǎng)站!
    13482402338
    技術(shù)文章

    TECHNICAL ARTICLES

    當(dāng)前位置:首頁(yè)  -  技術(shù)文章  -  溶酪巨球菌PCR檢測(cè)試劑盒反應(yīng)五要素

    溶酪巨球菌PCR檢測(cè)試劑盒反應(yīng)五要素

    更新時(shí)間:2021-03-17點(diǎn)擊次數(shù):914

    溶酪巨球菌PCR檢測(cè)試劑盒反應(yīng)五要素:
    參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
    引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
    ①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
    ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
    ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
    ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
    ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
    ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
    ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
    引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

    TEL:021-61210612

    掃碼加微信

    久久久久久久综合综合狠狠| 久久精品国产只有精品66| 久久综合丝袜日本网| 久久久国产精品va麻豆 | 国产亚洲精久久久久久无码77777 国产亚洲精品久久久久秋霞 | 久久99国产精一区二区三区| 亚洲精品NV久久久久久久久久 | 精品久久一区二区| a级成人毛片久久| 人妻无码久久精品人妻| 久久久久久久岛国免费播放| 日韩美女18网站久久精品| 久久无码AV一区二区三区| 亚洲va久久久噜噜噜久久| 国产99久久久国产精免费| 曰产无码久久久久久精品| 日韩av无码久久精品免费| 久久福利青草精品资源站免费| 国产精品久久久久久久久kt| 久久精品无码专区免费青青| 亚洲中文字幕久久精品无码喷水| 国产成人综合久久精品下载| 久久国产色AV免费看| 久久无码无码久久综合综合| 久久久高清免费视频| 久久精品人人槡人妻人人玩AV| 久久青草精品38国产免费| 久久综合一区二区无码| 日韩十八禁一区二区久久| 色综合久久综合中文小说| 伊人久久五月丁香综合中文亚洲| 久久人人爽人人爽人人AV | 久久精品女人天堂AV麻| 日韩久久精品一区二区三区| 亚洲精品视频久久| 91精品久久国产青草| 99精品久久99久久久久| 人妻少妇久久中文字幕一区二区| 久久只有这里的精品69| 亚洲AV无一区二区三区久久| 中文国产成人精品久久一区|