大鼠ELISA試劑盒樣品的收集、處理及保存

更新時間：2021-06-10

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　　大鼠ELISA試劑盒的樣品類型(SAMPLE TYPES)上標本必須為液體，不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿。每個標本量收集體積＝100ul×檢測種類。取材前須有產品說明書。收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天進行檢測的標本，儲存在4℃備用，如有特殊原因需要周期收集標本，將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復凍融。標本2-8℃可保存48小時，-20℃可保存1個月。-70℃可保存6個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。

　　大鼠ELISA試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被活性氧簇（ROS）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的活性氧簇（ROS）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。

　　大鼠ELISA試劑盒樣品的收集、處理及保存方法：

　　1.血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

　　2.血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。

　　3.細胞上清液：3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

　　4.組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。

　　5.保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。