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    氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量測定操作步驟

    更新時間:2021-07-07點擊次數:2563

    氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量測定操作步驟:

    1.標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在第一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在第一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從第一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。
    2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
    3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
    4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
    5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
    7.溫育:操作同3。
    8.洗滌:操作同5。
    9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
    10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
    11.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

    BrainHeartInfusionAgar 500g原裝 BD 241820
    (腦心浸液瓊脂)
    BrainInfusionPower 1kg 國產
    (腦浸粉)
    Brij-35 200g/5kg原裝 Sigma P1254
    (布里杰-35)
    Brilliantgreen 10g/25g/50g/100g原裝 Amresco0502
    (亮綠)
    BrilliantGreenagar 500g原裝 BD 228530
    (亮綠瓊脂)
    BromcresolBlue,Na 5g/25g Amresco分裝
    (溴酚蘭)
    BromcresolGreen 5g/25g/50g/500g原裝 Amresco 0816
    (溴甲酚綠)
    BromothymolBlueNa 5g/25g/50g原裝 Amresco 0554
    (溴麝香草酚蘭
    (溴百里酚蘭鈉))
    BSA,FractionV 5g/25g/100g Sigma分裝
    (牛血清白蛋白)
    CalciumChloride2H2O 100g/500g/5kg原裝 Sigma C3881
    (氯化鈣)
    CalciumIonophoreIII 1mg原裝/5mg原裝 Sigma C7522
    (鈣離子載體)
    CalfThymusDNA 50mg/100mg/500mg Sigma D1501
    (小牛胸腺DNA)

    TEL:021-61210612

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