小鼠opiorphin elisa檢測(cè)試劑盒操作步驟

小鼠opiorphin elisa檢測(cè)試劑盒操作步驟：

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

小鼠骨髓瘤細(xì)胞；Fox-NY

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞；MEF

小鼠淋巴瘤細(xì)胞(NK靶細(xì)胞)；YAC-1

野生型人c-kit受體細(xì)胞株；A7d

小鼠原B細(xì)胞株；BaF3

小鼠腦瘤細(xì)胞；BC3H1

小鼠成肌細(xì)胞；C2C12

小鼠肝癌細(xì)胞；Hepa 1-6 [Hepa1-6]

小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞；P815

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞；3T6-Swiss albino

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞；C3H 10T1/2 2A6

小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞；DCS

小鼠淋巴瘤細(xì)胞；EL4

小鼠前胃癌細(xì)胞；MFC

小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞；RAW 264.7 [RAW264.7

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞；3T3-L1

小鼠乳腺癌細(xì)胞；CCC-Ca761-03

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞；BALB/C 3T3

小鼠淋巴細(xì)胞白血病；L1210

小鼠肺腺癌細(xì)胞系；LA795

C3H/An小鼠結(jié)締組織細(xì)胞（L929-TK-）；LTK-

小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞；SH2

小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞；SH3

倉鼠/小鼠雜交瘤細(xì)胞；145-2C11

小鼠黑色素瘤細(xì)胞；B16

小鼠T淋巴細(xì)胞；Cl.Ly1+2-/9

小鼠單核巨噬細(xì)胞；J774A.1

小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化)；M-1

綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠前胃癌細(xì)胞；MFC-GFP

小鼠腎足細(xì)胞；Mouse podocyte

小鼠淋巴瘤細(xì)胞；P388D1(IL-1)

小鼠子宮頸癌細(xì)胞；U14

綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠子宮頸癌細(xì)胞；U14-GFP

小鼠漿細(xì)胞瘤；MPC-11

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞；PA317

轉(zhuǎn)PYTL基因小鼠睪丸支持細(xì)胞；15P-1

BALB/C小鼠肝上皮細(xì)胞；BNL 1ME A.7R.1

小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞；CT26.WT [CT26WT]