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    當前位置:首頁  -  產品中心  -  PCR試劑盒  -  PCR檢測試劑盒  -  50T丙酸蛛網菌PCR檢測試劑盒說明書

    丙酸蛛網菌PCR檢測試劑盒說明書

    產品簡介

    丙酸蛛網菌PCR檢測試劑盒說明書
    上海聯祖生物相關產品:
    TBA檢測試劑盒
    用于鑒別腸道菌發酵葡萄糖和乳糖,及產生硫化氫的生化反應(GB/T4789.28-2003 中4.29,GB/T4789....克氏雙糖鐵瓊脂

    更新時間:2021-03-14
    訪問次數:691
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    組成及試劑配制:
    1、酶標板:一塊(96孔)
    2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
    3、 樣品稀釋液:1×20ml。
    4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
    5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
    注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

     產品名稱

     丙酸蛛網菌PCR檢測試劑盒說明書

     英文名稱

     Arachnia propionicaPCR

     貨號

     LZP6375

    實驗過程:
    一、試劑準備
    1. DNA模板
    2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
    3.10×PCR Buffer
    4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
    5.Taq酶
    二、操作步驟
    1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
    dNTP mixl                 4μl
    引物1(10pM)               2μl
    引物2(10PM)              2μl
    Taq酶(2U/μl)            1μl
    DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
    ddH2O至               50 μl
    PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
    2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
    3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
    4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
    三、注意事項
    1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
    2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
    3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
    4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
    5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
    6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
    7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
    一、 試劑的準備
    從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
    設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
    試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
    熒光PCR反應液 14µL N×14µL
    酶混合物 1 µL N×1 µL
    總量 15 µL N×15µL
    1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
    7.2 qPCR反應條件
    將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
    推薦循環條件:
    1循環 50℃ for 2 min
    預變性 1循環 95℃ for 10 min
    PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
    60℃ for 60 sec
    60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
    小鼠白介素1β前體(pro-IL1B)elisa試劑盒Anti-CD2AP Antibody研究領域  心血管 細胞生物 信號轉導 糖尿病  

    小鼠白介素1α(IL-1α)elisa試劑盒Anti-CD27 Antibody(原貨號PB0974)研究領域  心血管 細胞生物 信號轉導 糖尿病  

    小鼠Toll樣受體7(TLR7)elisa試劑盒Anti-CD2AP Antibody研究領域  細胞生物 發育生物學 細胞周期蛋白  

    小鼠CD44分子(CD44)elisa試劑盒Anti-CD274 Antibody研究領域  細胞生物 信號轉導 細胞周期蛋白 轉錄調節因子 激酶和磷酸酶  

    小鼠3-α羥基類固醇脫氫酶(Akr1c9)elisa試劑盒Anti-CD274 Antibody研究領域  細胞生物 神經生物學 信號轉導 G蛋白偶聯受體 G蛋白信號  

    豚鼠降鈣素基因相關肽(CGRP)elisa試劑盒Anti-CD2AP Antibody研究領域  腫瘤 細胞生物 神經生物學 細胞膜蛋白  

    豚鼠黃體激素(LH)elisa試劑盒Anti-CD30/TNFRSF8 Antibody研究領域  細胞生物 神經生物學 信號轉導 干細胞  

    豚鼠單胺氧化酶(MAO)elisa試劑盒Anti-CD33 Antibody研究領域  細胞生物 神經生物學 信號轉導 干細胞 表觀遺傳學  

    人幾丁質酶1(殼三糖酶)(CHIT1)elisa試劑盒Anti-CD34 Antibody研究領域  細胞生物 免疫學 染色質和核信號 表觀遺傳學  

    人激肽釋放酶1(KLK 1)elisa試劑盒Anti-CD33 Antibody(原貨號PB0975)研究領域  細胞生物 神經生物學 轉錄調節因子 表觀遺傳學  

    人基質細胞衍生因子1β(SDF-1β/SDF1B)elisa試劑盒Anti-CD3E Antibody研究領域  神經生物學 表觀遺傳學  

    人肌球蛋白(MYS)elisa試劑盒Anti-CD3E Antibody研究領域  細胞生物 神經生物學 信號轉導 表觀遺傳學  

    人琥珀酰輔酶A合成酶(SCS)elisa試劑盒Anti-CD36 Antibody(原貨號PB0398)研究領域  細胞生物 發育生物學 神經生物學 信號轉導 轉錄調節因子 表觀遺傳學  

    人骨退化特異標志物(CTX-2)elisa試劑盒Anti-CD34 Antibody研究領域  細胞生物 神經生物學 干細胞 表觀遺傳學  

    人二磷酸尿核苷葡糖醛酸基轉移酶2家族肽B4(UGT2B4)elisa試劑盒Anti-CD3E Antibody研究領域  神經生物學 生長因子和激素 通道蛋白 細胞膜受體  

    Nutrientagarslant

    ModifiedFreyMedium

    伊紅美藍瓊脂 (EMB) Eosin-Methylene Blue Agar 250 弱選擇性培養基、分離腸道致病菌,特別是大腸桿菌(SN標準)

    incubationmedia

    PotatoDextroseAgar

    假單胞F瓊脂  Pseudomonas Agar F  250克  銅綠(綠膿)假單胞菌色素生成試驗

    衛矛醇半固體瓊脂  Dulcitol Semisolid Agar  10克  細菌衛矛醇發酵試驗

    瓊脂  NO.4 Agar Base  250克  霍亂弧菌選擇性分離培養

    我妻氏血瓊脂培養基基礎  Wagstsuma Agar Base  250克  副溶血性弧菌的溶血試驗
    丙酸蛛網菌PCR檢測試劑盒說明書小鼠血管內皮瘤細胞,EOMA細胞1 x 10^6 cells/T25培養瓶

    小鼠胰腺癌beta細胞,BETA-TC-6細胞1 x 10^6 cells/T25培養瓶

    小鼠原B細胞株,BAF3細胞1 x 10^6 cells/T25培養瓶

    小鼠雜交瘤細胞,SDOW-17細胞1 x 10^6 cells/T25培養瓶

    小鼠正常肝細胞,NCTC1469細胞1 x 10^6 cells/T25培養瓶

    小鼠子細胞,U14細胞1 x 10^6 cells/T25培養瓶

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