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    節(jié)桿菌通用PCR檢測試劑盒價格

    產(chǎn)品簡介

    節(jié)桿菌通用PCR檢測試劑盒價格
    上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
    BAX檢測試劑盒
    水麥冬酸
    皮質(zhì)甾酮
    表諾多星
    左旋肉堿

    更新時間:2021-03-14
    訪問次數(shù):704
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    組成及試劑配制:
    1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
    2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
    3、 樣品稀釋液:1×20ml。
    4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
    5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
    注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

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     產(chǎn)品名稱

     節(jié)桿菌通用PCR檢測試劑盒價格

     英文名稱

     Arthrobacter spp.PCR

     貨號

     LZP6381

    實驗過程:
    一、試劑準(zhǔn)備
    1. DNA模板
    2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
    3.10×PCR Buffer
    4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
    5.Taq酶
    二、操作步驟
    1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
    dNTP mixl                 4μl
    引物1(10pM)               2μl
    引物2(10PM)              2μl
    Taq酶(2U/μl)            1μl
    DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
    ddH2O至               50 μl
    PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
    2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
    3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
    4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
    三、注意事項
    1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個的PCR實驗室。
    2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
    3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
    4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
    5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
    6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
    7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
    一、 試劑的準(zhǔn)備
    從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
    設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
    試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
    熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
    酶混合物 1 µL N×1 µL
    總量 15 µL N×15µL
    1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
    7.2 qPCR反應(yīng)條件
    將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
    推薦循環(huán)條件:
    1循環(huán) 50℃ for 2 min
    預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
    PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
    60℃ for 60 sec
    60℃延伸時收集熒光信號。報告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
    伊立替康97682-44-5*Anti-CDC42 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 新陳代謝  

    多聚左旋賴氨酸溶液實驗步驟Anti-CDC42 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞周期蛋白 激酶和磷酸酶 Alzheimer's  

    S-羧甲基-L-半胱氨酸實驗步驟Anti-CDC5L Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 心血管 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 新陳代謝  

    亞氨基二乙酸保存Anti-CDC45 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 通道蛋白 細(xì)胞類型標(biāo)志物  

    O-苯并三氮唑-N,N,N,N,-四甲脲六氟磷酸酯使用說明書Anti-CDC6 Antibody產(chǎn)品類型  一抗  藥物與化合物抗體   

    D-苯甘氨酸價格Anti-CDCP1 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 免疫學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)  

    N-乙酰-DL-色氨酸使用說明書Anti-CDC73 Antibody研究領(lǐng)域  藥物及化合物  

    環(huán)氧瓊脂糖凝膠6B實驗步驟Anti-CDC6 Antibody研究領(lǐng)域  免疫學(xué)  

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    豬白介素10(IL-10)elisa試劑盒Anti-CDH5 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 發(fā)育生物學(xué)  

    小鼠微管蛋白β3(TUBB3)elisa試劑盒Anti-CDH23 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué)  

    PotatoDextroseSemisolidAgar

    MKTTn肉湯基礎(chǔ) 250(g) incubation media MKTTn肉湯基礎(chǔ) 250(g)

    3.5% NaC1乳糖發(fā)酵管 3.5% NaC1乳糖發(fā)酵管 20支 BR

    乳糖膽鹽培養(yǎng)基250化妝品中糞大腸菌群的測定(GB標(biāo)準(zhǔn))incubationmedia乳糖膽鹽培養(yǎng)基250化妝品中糞大腸菌群的測定(GB標(biāo)準(zhǔn))

    改良CCD瓊脂基礎(chǔ)(mCCD) 250g 彎曲桿菌的分離培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))

    SCDLP液體培養(yǎng)基  SCDLP Broth Medium  250克  化妝品檢驗中樣品制備、增菌

    假單胞菌屬選擇瓊脂  Cetrimide Agar  250克  綠膿桿菌的分離培養(yǎng)

    普通瓊脂斜面培養(yǎng)基(PH8.0-8.2)  Common Nutrient Agar  250克  一般細(xì)菌的培養(yǎng),分離培養(yǎng)霍亂弧菌,埋迪霉菌鑒定用

    PDP瓊脂  King Medium A  250克  綠膿菌色素測定
    節(jié)桿菌通用PCR檢測試劑盒價格三羥基*基輔酶A合成酶1Creticoside C中文名:別名:分子式:C26H44O8

    熱休克因子1抗體Diosbulbin D中文名:黃獨素D別名:分子式:C19H20O6

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    磷酸化三羥基*基輔酶A還原酶抗體8(14),15-Isopimaradiene-3β,18-diol中文名:別名:Isopimara-8(14),15-diene-3β,18-diol分子式:C20H32O2

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