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    雙芽巴貝斯蟲PCR檢測試劑盒廠家

    產(chǎn)品簡介

    雙芽巴貝斯蟲PCR檢測試劑盒廠家
    上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
    sFAS/Apo-1檢測試劑盒
    培養(yǎng)基原材料酵母浸膏

    更新時間:2021-03-14
    訪問次數(shù):610
    詳細介紹在線留言

    注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

     產(chǎn)品名稱

     雙芽巴貝斯蟲PCR檢測試劑盒廠家

     英文名稱

     Babesia bigeminaPCR

     貨號

     LZP6418

    組成及試劑配制:
    1、酶標板:一塊(96孔)
    2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
    3、 樣品稀釋液:1×20ml。
    4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
    5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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    實驗過程:
    一、試劑準備
    1. DNA模板
    2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
    3.10×PCR Buffer
    4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
    5.Taq酶
    二、操作步驟
    1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
    dNTP mixl                 4μl
    引物1(10pM)               2μl
    引物2(10PM)              2μl
    Taq酶(2U/μl)            1μl
    DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
    ddH2O至               50 μl
    PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
    2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
    3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
    4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
    三、注意事項
    1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設(shè)立一個的PCR實驗室。
    2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
    3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
    4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
    5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
    6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
    7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
    N-乙酰-L-肉堿鹽酸鹽使用說明書Anti-DRP1/DNM1L Antibody研究領(lǐng)域  細胞生物 信號轉(zhuǎn)導 細胞骨架 新陳代謝  

    FMOC-L-脯氨酸實驗步驟Anti-DROSHA Antibody研究領(lǐng)域  細胞生物 免疫學  

    GST瓊脂糖凝膠4FF保存Anti-DSG2 Antibody研究領(lǐng)域  細胞生物 細胞類型標志物  

    透析袋4000保存Anti-DSG1 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細胞生物 信號轉(zhuǎn)導 細胞類型標志物 新陳代謝  

    磺胺甲基嘧啶實驗步驟Anti-DSG2 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 神經(jīng)生物學 信號轉(zhuǎn)導 新陳代謝  

    5-氟胞嘧啶保存Anti-DSG3 Antibody研究領(lǐng)域  細胞生物 免疫學  

    雙氫鏈霉素保存Anti-DUT Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細胞生物 信號轉(zhuǎn)導 新陳代謝 表觀遺傳學  

    維拉帕米鹽酸鹽實驗步驟Anti-DSP Antibody研究領(lǐng)域  細胞生物 信號轉(zhuǎn)導 糖尿病 新陳代謝  

    百里酚藍鈉價格Anti-DUSP3 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細胞生物 信號轉(zhuǎn)導 新陳代謝 表觀遺傳學  

    亮綠SF(淡黃)價格Anti-DUSP3 Antibody研究領(lǐng)域  細胞生物 生長因子和激素 細胞分化  

    溴甲酚綠鈉價格Anti-DVL1 Antibody研究領(lǐng)域  細胞生物 信號轉(zhuǎn)導 細胞分化  

    蘇丹Ⅱ?qū)嶒灢襟EAnti-DVL2 Antibody研究領(lǐng)域  細胞生物 神經(jīng)生物學 細胞膜受體  

    4-氯苯氧乙酸鈉價格Anti-DYNLT1 Antibody研究領(lǐng)域  細胞生物 免疫學 信號轉(zhuǎn)導 G蛋白偶聯(lián)受體 G蛋白信號  

    無瓊脂腦心浸液使用說明書Anti-DYRK1A Antibody研究領(lǐng)域  細胞生物 免疫學 神經(jīng)生物學 信號轉(zhuǎn)導 G蛋白偶聯(lián)受體 G蛋白信號  

    豬多巴胺(DA)elisa試劑盒Anti-DVL3 Antibody研究領(lǐng)域  細胞生物 免疫學 信號轉(zhuǎn)導 G蛋白偶聯(lián)受體 G蛋白信號  

    APT肉湯250g異質(zhì)發(fā)酵乳酸桿菌和其它需高含量鹽酸胺素菌的培養(yǎng)。

    mCPC培養(yǎng)基 mCPC Medium 弧菌分離培養(yǎng)(FDA標準)

    示蛋白胨 Tryptose 250克 BR

    TGY瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶芽孢菌的培養(yǎng)incubationmediaTGY瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶芽孢菌的培養(yǎng)

    Aliz-gal肉湯(茜素-β-半乳糖苷瓊脂) 100g 食品中大腸菌群快速檢測

    肝素抗凝管  肝素抗凝管  5毫升

    Rambach瓊脂  Rambach瓊脂  250克  金黃色葡萄球菌快速顯色分離培養(yǎng)

    耶爾森氏菌顯色培養(yǎng)基  耶爾森氏菌顯色培養(yǎng)基  250克  耶爾森氏菌快速顯色分離培養(yǎng)

    乳酸菌檢測計數(shù)顯色培養(yǎng)基  乳酸菌檢測計數(shù)顯色培養(yǎng)基  250克  乳酸菌快速顯色分離培養(yǎng)
    雙芽巴貝斯蟲PCR檢測試劑盒廠家E3連接酶抑制素受體抗體ent-17-Hydroxykaur-15-en-19-oic acid中文名:別名:分子式:C20H30O3

    HEG同源蛋白1抗體Grandifloric acid中文名:別名:Grandiflorolic acid分子式:C20H30O3

    缺氧誘導基因1C蛋白抗體ent-3β-Cinnamoyloxykaur-16-en-19-oic acid中文名:別名:分子式:C29H36O4

    腫瘤抑制蛋白抗體3α-Cinnamoyloxypterokaurene L3中文名:別名:ent-3β-Cinnamoyloxy-9α-hydroxykaur-16-en-19-oic acid分子式:C29H36O5

    丙型肝炎病毒NS5B抗體2-Oxokolavel中文名:別名:分子式:C20H32O2
    檢測步驟:
    一、 試劑的準備
    從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
    設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
    試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
    熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
    酶混合物 1 µL N×1 µL
    總量 15 µL N×15µL
    1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
    7.2 qPCR反應(yīng)條件
    將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
    推薦循環(huán)條件:
    1循環(huán) 50℃ for 2 min
    預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
    PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
    60℃ for 60 sec
    60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設(shè)置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

     

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