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    牛腺病毒型PCR檢測試劑盒說明書

    產品簡介

    牛腺病毒型PCR檢測試劑盒說明書
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    OAT-1 (Organic anion transporter 1)mouse、rat 陰離子轉運蛋白-1(大、小鼠同源:人源見bs-0606P)

    更新時間:2021-03-14
    訪問次數:680
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    組成及試劑配制:
    1、酶標板:一塊(96孔)
    2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
    3、 樣品稀釋液:1×20ml。
    4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
    5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
    注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

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     產品名稱

     牛腺病毒型PCR檢測試劑盒說明書

     英文名稱

     Bovine Adenovirus(BAV1) 3  PCR

     貨號

     LZP6483

    實驗過程:
    一、試劑準備
    1. DNA模板
    2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
    3.10×PCR Buffer
    4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
    5.Taq酶
    二、操作步驟
    1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
    dNTP mixl                 4μl
    引物1(10pM)               2μl
    引物2(10PM)              2μl
    Taq酶(2U/μl)            1μl
    DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
    ddH2O至               50 μl
    PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
    2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
    3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
    4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
    三、注意事項
    1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
    2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
    3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
    4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
    5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
    6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
    7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
    一、 試劑的準備
    從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
    設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
    試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
    熒光PCR反應液 14µL N×14µL
    酶混合物 1 µL N×1 µL
    總量 15 µL N×15µL
    1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
    7.2 qPCR反應條件
    將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
    推薦循環條件:
    1循環 50℃ for 2 min
    預變性 1循環 95℃ for 10 min
    PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
    60℃ for 60 sec
    60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
    擬人參皂苷RT5 98474-78-3實驗方法Anti-KCNA1 Antibody研究領域  細胞生物 免疫學 發育生物學 信號轉導 干細胞 生長因子和激素 細胞膜受體 細胞表面分子  

    藤黃酸2752-65-0價格Anti-KCNA3 Antibody研究領域  細胞生物 神經生物學 信號轉導 生長因子和激素 G蛋白偶聯受體 G蛋白信號  

    楊梅素529-44-2 實驗方法Anti-KCNA4 Antibody研究領域  細胞生物 神經生物學 細胞類型標志物  

    雞屎藤苷20547-45-9價格Anti-KCNA5 Antibody研究領域  細胞生物 干細胞 細胞表面分子 細胞類型標志物  

    黃花敗醬苷C17233-22-6實驗方法Anti-KCNA5 Antibody研究領域  細胞生物 信號轉導 細胞凋亡 細胞周期蛋白 轉錄調節因子  

    5補充中2 123350-57-2?實驗方法Anti-KCNB1 Antibody(原貨號PB0149)研究領域  細胞生物 神經生物學 信號轉導 G蛋白偶聯受體 G蛋白信號  

    Levatin 140670-84-4 實驗步驟Anti-KCNA6 Antibody研究領域  腫瘤 細胞生物 神經生物學 信號轉導 表觀遺傳學  

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    銀椴苷20316-62-5 *Anti-KCNH1 Antibody研究領域  腫瘤 免疫學 生長因子和激素  

    女貞甙260413-62-5實驗方法Anti-KCND2 Antibody研究領域  腫瘤 細胞生物 免疫學  

    苦玄參苷ⅠB *Anti-KCND3 Antibody研究領域  腫瘤 細胞生物 信號轉導 細胞類型標志物 新陳代謝  

    D-甲硫氨酸價格Anti-KCNH1 Antibody研究領域  腫瘤 細胞生物 免疫學 神經生物學  

    BOC-L-苯丙氨酸保存Anti-KCNIP2 Antibody研究領域  

    L-組氨酸鹽酸鹽一物使用說明書Anti-KCNH2 Antibody研究領域  腫瘤 細胞生物 信號轉導 干細胞  

    N-乙酰-L-半胱氨酸使用說明書Anti-KCNJ1 Antibody研究領域 細胞生物 免疫學

    甘油GlycerolAR500ml

    T0254-10GL-Tryptophan L-色安酸73-22-310g34

    R0250-5GD-(+)-Raffise D-綿子糖 (蜜三糖)17629-30-05g

    Hoechst Staining Kit

    甲硝唑5g

    乙酸甲酯¤metxyl acetateGCS2ml

    SM1133O`GeneRuler 50bp DNA Ladder, ready-to-use178

    P2250-100GVitamin B5 維生素B5(D-泛酸鈣)137-08-6100g

    十六烷基*基溴化胺50g

    α-淀粉酶100mg

    大鼠野鼠色基因相關蛋白(AGRP)ELISA試劑盒 ,英文名: AGRP ELISA Kit

    The main tissues of goats compatibility complex (MHC/OLA) ELISA Kit 山羊主要組織相容性復合體(MHC/OLA)ELISA試劑盒

    MouseAngiopoietin2,ANG-2ELISAKit 小鼠血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

    CLIAKitforHumanCoronavirusesIgGELISAkit人冠狀病毒規格:48T/96T

    細胞b-葡糖苷酸酶活性染色試劑盒50次

    ELISAKitOPGL大鼠骨保護素配體規格:48T/96T
    牛腺病毒型PCR檢測試劑盒說明書Strong acid cation exchange resin吸附樹脂 250G

    Potassium hexafluorophosphate,98%通用試劑 50G

    Potassium biphthalate,≥99.95%通用試劑 100G

    Potassium stearate通用試劑 250G

    Potassium citrate通用試劑 100G

    Potassium benzoate,≥99.0%通用試劑 250G

    Potassium bitartrate,99%通用試劑 100G

    Potassium tartrate dibasic hemihydrate...通用試劑 100G

    Potassium tetraoxalate dihydrate,≥99.5%通用試劑 50G

    Potassium titanyl oxalate通用試劑 100G

    Potassium bixalate,99.99%通用試劑 100G

    Potassium oxalate mohydrate,≥98.5%通用試劑 100G

    Potassium acetate,≥99.0%通用試劑 100G

    Potassium lurite,99.5%通用試劑 25G

    Potassium fluoroaluminate通用試劑 100G

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