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    當(dāng)前位置:首頁  -  產(chǎn)品中心  -  PCR試劑盒  -  PCR檢測(cè)試劑盒  -  50T牛病毒性腹瀉病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格

    牛病毒性腹瀉病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格

    產(chǎn)品簡介

    牛病毒性腹瀉病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格
    上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
    sLR檢測(cè)試劑盒
    histone H3-like protein 組蛋白H3樣蛋白(N端多肽)
    HIV-1(human immunodeficiency virus type 1) 艾滋病病毒-1/人類免疫缺陷病毒1型(抗原)

    更新時(shí)間:2021-03-14
    訪問次數(shù):567
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    ?
    注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

     產(chǎn)品名稱

     牛病毒性腹瀉病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格

     英文名稱

     Bovine Viral Diarrhea Virus (BVDV)RTPCR

     貨號(hào)

     LZP6504

    實(shí)驗(yàn)過程:
    一、試劑準(zhǔn)備
    1. DNA模板
    2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
    3.10×PCR Buffer
    4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
    5.Taq酶
    二、操作步驟
    1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
    dNTP mixl                 4μl
    引物1(10pM)               2μl
    引物2(10PM)              2μl
    Taq酶(2U/μl)            1μl
    DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
    ddH2O至               50 μl
    PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
    2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
    3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
    4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
    三、注意事項(xiàng)
    1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
    2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
    3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
    4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
    5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲(chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
    6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
    7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測(cè)步驟:
    一、 試劑的準(zhǔn)備
    從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
    設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
    試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
    熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
    酶混合物 1 µL N×1 µL
    總量 15 µL N×15µL
    1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
    7.2 qPCR反應(yīng)條件
    將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
    推薦循環(huán)條件:
    1循環(huán) 50℃ for 2 min
    預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
    PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
    60℃ for 60 sec
    60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
    組成及試劑配制:
    1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
    2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
    3、 樣品稀釋液:1×20ml。
    4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
    5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
    人神經(jīng)少突起前質(zhì)膠質(zhì)細(xì)胞報(bào)價(jià)Anti-MCUR1 Antibody研究領(lǐng)域  免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 細(xì)胞膜受體  

    大鼠心肌成纖維細(xì)胞說明書Anti-MCU Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞膜受體  

    小鼠腎小管平滑肌細(xì)胞報(bào)價(jià)Anti-MCM7 Antibody(原貨號(hào)PB0260)研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 G蛋白偶聯(lián)受體  

    小鼠破骨細(xì)胞說明書Anti-MDM2 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 激酶和磷酸酶  

    小鼠成骨細(xì)胞說明書Anti-MDM4 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 激酶和磷酸酶  

    BGC-823(人胃癌細(xì)胞)現(xiàn)貨供應(yīng)Anti-MDK Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 免疫學(xué) G蛋白偶聯(lián)受體 G蛋白信號(hào)  

    HCT 116(人結(jié)腸癌細(xì)胞)說明書Anti-MDM2 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子  

    HGC-27(人胃癌細(xì)胞,未分化)價(jià)格Anti-MDC1 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子  

    HL-7702(L-02) (人肝正常細(xì)胞)說明書Anti-MED14 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 心血管 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 發(fā)育生物學(xué) 染色質(zhì)和核信號(hào) 干細(xì)胞 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 結(jié)合蛋白 表觀遺傳學(xué)  

    IMR-32(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)價(jià)格Anti-MECP2 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 細(xì)胞膜受體  

    JeKo-1(人套細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞)價(jià)格Anti-MED13 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 免疫學(xué) 染色質(zhì)和核信號(hào) 表觀遺傳學(xué)  

    KU812(人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞)現(xiàn)貨供應(yīng)Anti-ME2 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子  

    MFC(小鼠胃癌細(xì)胞)價(jià)格Anti-MED15 Antibody研究領(lǐng)域  免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 細(xì)胞周期蛋白 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子  

    NRK-52E(大鼠腎小管導(dǎo)管上皮細(xì)胞)價(jià)格Anti-MED20 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 免疫學(xué) G蛋白偶聯(lián)受體 G蛋白信號(hào)  

    Raji(人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞)報(bào)價(jià)Anti-MED18 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 免疫學(xué) G蛋白偶聯(lián)受體 G蛋白信號(hào)  

    ¤metxyl alcoholAR500ml

    P1274-25MGPoly-L-Lysine L-多聚賴安酸 7-15萬--25mg36

    T9250-1gThymidine 胸腺嘧啶核苷50-89-51g

    本甲基磺酰扶10ml(100mM)

    MUG250mg

    環(huán)己烷CyclohexaneHPLC500ml

    PCR-02CP-RT-C0.2 ml PCR八排管(平蓋)198

    D0340-5GVitamin H (D-Biotin) 維生素H (D-生物素)

    D-(+)-Galactosamine, xy7chloride5g

    對(duì)硝基本-β-D-半乳糖苷5g

    大鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

    人心肌肌鈣蛋白T(cTn-T)免疫試劑盒 Human cTn-T ELISA Kit

    氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/48樣

    Ratmaixmetalloproteinase4,MMP-4ELISA試劑盒大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

    HumanHemoglobinH,HbHELISA試劑盒人血紅蛋白H(HbH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

    Humanlipoproteinlipase,LPLELISAKit人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
    牛病毒性腹瀉病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格白介素11抗體Macrocarpal I中文名:大果桉醛I別名:分子式:C28H42O7

    白介素16抗體6,9,10-Trihydroxy-7-megastigmen-3-one中文名:別名:分子式:C13H22O4

    環(huán)指蛋白217抗體Megastigm-7-ene-3,5,6,9-tetraol中文名:別名:分子式:C13H24O4

    整合素αVβ1抗體1,3,5-Cadinatriene-3,8-diol中文名:別名:Calamenene-3,7-diol分子式:C15H22O2

    白介素2抗體(人)Teuclatriol中文名:別名:4,6,10-Guaianetriol分子式:C15H28O3

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