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    剛果嗜皮菌PCR檢測試劑盒規格

    產品簡介

    剛果嗜皮菌PCR檢測試劑盒規格
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    更新時間:2021-03-14
    訪問次數:406
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    注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

     產品名稱

     剛果嗜皮菌PCR檢測試劑盒規格

     英文名稱

     Dermatophilus congolensisPCR

     貨號

     LZP6648

    組成及試劑配制:
    1、酶標板:一塊(96孔)
    2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
    3、 樣品稀釋液:1×20ml。
    4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
    5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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    實驗過程:
    一、試劑準備
    1. DNA模板
    2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
    3.10×PCR Buffer
    4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
    5.Taq酶
    二、操作步驟
    1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
    dNTP mixl                 4μl
    引物1(10pM)               2μl
    引物2(10PM)              2μl
    Taq酶(2U/μl)            1μl
    DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
    ddH2O至               50 μl
    PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
    2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
    3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
    4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
    三、注意事項
    1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
    2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
    3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
    4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
    5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
    6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
    7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
    重樓皂甙I50773-41-6實驗步驟Anti-APP Antibody研究領域  腫瘤 信號轉導 細胞凋亡 轉錄調節因子 激酶和磷酸酶 線粒體

    構樹堿A173220-07-0*Anti-APOC2 Antibody研究領域  腫瘤 細胞生物 免疫學 信號轉導 細胞凋亡 轉錄調節因子 激酶和磷酸酶 線粒體

    白皮杉醇10083-24-6?*Anti-APPBP2 Antibody研究領域  腫瘤 免疫學 信號轉導 細胞凋亡 轉錄調節因子 激酶和磷酸酶 線粒體

    鬧羊花毒素II26116-89-2 *Anti-AQP12A Antibody研究領域  腫瘤 免疫學 信號轉導 細胞凋亡 轉錄調節因子 激酶和磷酸酶 線粒體

    松屬素480-39-7*Anti-ARAF Antibody研究領域  腫瘤 細胞生物 信號轉導 細胞周期蛋白 轉錄調節因子 激酶和磷酸酶

    澳洲茄胺126-17-0價格Anti-ARFGAP3 Antibody研究領域  腫瘤 細胞生物 免疫學

    大豆皂苷Bb51330-27-9*Anti-ARFGEF2 Antibody研究領域  細胞生物 信號轉導 激酶和磷酸酶

    蒙花甙480-36-4價格Anti-ARFIP1 Antibody研究領域  腫瘤 細胞生物 信號轉導 激酶和磷酸酶

    斷血流皂甙A916347-31-4實驗步驟Anti-ARHGAP11A Antibody研究領域  腫瘤 細胞生物 信號轉導 激酶和磷酸酶

    絞股藍皂苷XLIX 實驗方法Anti-ARHGAP1 Antibody研究領域  腫瘤 細胞生物 神經生物學 信號轉導 干細胞 細胞粘附分子

    麥角固醇57-87-*Anti-ARFGEF2 Antibody研究領域  腫瘤 細胞生物 神經生物學 信號轉導 干細胞 細胞粘附分子

    漢黃芩素632-85-9*Anti-ARHGAP17 Antibody研究領域  腫瘤 細胞生物 神經生物學 信號轉導 干細胞 細胞粘附分子

    白蠟樹素6035-49-0實驗方法Anti-ARHGAP18 Antibody研究領域  腫瘤 細胞生物 神經生物學 信號轉導 干細胞 細胞粘附分子

    DL-甲硫氨酸保存Anti-ARHGAP9 Antibody研究領域  腫瘤 細胞生物 神經生物學 信號轉導 干細胞 細胞粘附分子

    BOC-L-脯氨酸使用說明書Anti-ARHGDIA Antibody研究領域  腫瘤 細胞生物 神經生物學 信號轉導 干細胞

    2-  4-(二甲基)苯基二苯基膦  (1S,2R,5S)-2,6,6,8-四甲基三環[5.3.1.01.5]十一碳-8-烯

    戊酯  (1S,2R,5S)-2,6,6,8-四甲基三環[5.3.1.01.5]十一碳-8-烯  二苯基-2-基膦

    木素(脫堿)  二苯基-2-基膦  富勒烯

    3--5-(*基)芐胺  富勒烯  1-甲基-1,4-環己二烯

    Bis(2,4-pentanedio)nickel  乙酰丙鎳  3264-82-2

    NICKEL IODIDE  化鎳  13462-90-3

    Nickel oxide  三氧化二鎳  1314-06-3

    Nickel fluoride  化鎳  10028-18-9

    大鼠載脂蛋白B(APOB)ELISA試劑盒 ,英文名: APOB ELISA Kit

    Sheep ierleukin 1 beta (IL-1 beta) ELISA Kit 綿羊白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒

    MouseL-SelectinELISAkit 小鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

    CLIAKitforHumanFibrigenlikepeptide2,fgl2ELISAKit人纖維介素蛋白規格:48T/96T

    細胞/組織活性高爾基體分離試劑盒10次

    ELISAKitMMP-3大鼠基質金屬蛋白酶3規格:48T/96T
    剛果嗜皮菌PCR檢測試劑盒規格人細胞色素C(Cyt-C)ELISA試劑盒英文名稱:Human Cytochrome-C,Cyt-C ELISA Kit*

    人細胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Cytochrome P450c21/21-hydroxylase,CYP21A ELISA Kit進口/分裝

    人細胞色素P450c21B/21-羥化酶(CYP21B)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Cytochrome P450c21/21-hydroxylase,CYP21B ELISA Kit*

    人細胞外基質磷酸糖蛋白(MEPE)ELISA試劑盒 英文名稱:Human matrix extracellular phosphoglycoprotein,MEPE ELISA Kit進口/分裝

    人細胞纖維連接蛋白(cFn)ELISA試劑盒 英文名稱:Human cellular fibronectin,cFn ELISA Kit進口/原裝

    人細胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA試劑盒英文名稱:Human Cyclin-D1 ELISA Kit*

    6-羥多巴胺(6-OHDA)ELISA試劑盒 英文名稱:Human 6-hydroxydopamine,6-OHDA ELISA Kit進口/分裝
    檢測步驟:
    一、 試劑的準備
    從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
    設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
    試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
    熒光PCR反應液 14µL N×14µL
    酶混合物 1 µL N×1 µL
    總量 15 µL N×15µL
    1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
    7.2 qPCR反應條件
    將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
    推薦循環條件:
    1循環 50℃ for 2 min
    預變性 1循環 95℃ for 10 min
    PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
    60℃ for 60 sec
    60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

     

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