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    支原體通用PCR檢測試劑盒價(jià)格

    產(chǎn)品簡介

    支原體通用PCR檢測試劑盒價(jià)格
    上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
    DDC檢測試劑盒可將胰酶消化后細(xì)胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止進(jìn)一步的損傷

    更新時(shí)間:2021-03-13
    訪問次數(shù):724
    詳細(xì)介紹在線留言

    注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

     產(chǎn)品名稱

     支原體通用PCR檢測試劑盒價(jià)格

     英文名稱

     Mycoplasma spp.PCR

     貨號(hào)

     LZP7041

    組成及試劑配制:
    1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
    2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
    3、 樣品稀釋液:1×20ml。
    4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
    5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
    ?
    實(shí)驗(yàn)過程:
    一、試劑準(zhǔn)備
    1. DNA模板
    2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
    3.10×PCR Buffer
    4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
    5.Taq酶
    二、操作步驟
    1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
    dNTP mixl                 4μl
    引物1(10pM)               2μl
    引物2(10PM)              2μl
    Taq酶(2U/μl)            1μl
    DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
    ddH2O至               50 μl
    PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
    2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
    3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
    4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
    三、注意事項(xiàng)
    1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
    2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
    3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
    4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
    5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲(chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
    6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
    7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
    細(xì)胞表面蛋白分離試劑盒8次說明書Anti-Mad2L1研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡

    包涵體蛋白溶解及復(fù)性套裝100 次說明書Anti-MRP9/ABCC12研究領(lǐng)域  腫瘤 免疫學(xué) 干細(xì)胞 細(xì)胞類型標(biāo)志物 腫瘤細(xì)胞生物標(biāo)志物

    包涵體微量純化試劑盒20 次說明書Anti-MARK2蛋白分子量  predicted molecular weight: 48kDa

    包涵體中量純化試劑盒5次多少錢Anti-MATK蛋白分子量  predicted molecular weight: 19/30/37kDa

    親和層析柱1 mL哪里有賣Anti-MRP8/ABCC11研究領(lǐng)域  心血管 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 生長因子和激素

    包涵體大量純化試劑盒2次品牌Anti-MGAT5產(chǎn)品類型  一抗

    動(dòng)物線粒體總蛋白提取劑盒50 次品牌Anti-MIIP蛋白分子量  predicted molecular weight: 4.5kDa

    親和層析柱12 mL品牌Anti-MSX1蛋白分子量  predicted molecular weight: 36kDa

    親和層析柱3 mL說明書Anti-MARCH6研究領(lǐng)域  心血管 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞粘附分子

    親和層析柱50 mL說明書Anti-MUM1/FLJ14868蛋白分子量  predicted molecular weight: 45kDa

    蛋白折疊試劑盒100 次哪里有賣Anti-MAGEA10研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物

    親和層析柱30 mL哪里有賣Anti-MAGEA11研究領(lǐng)域  腫瘤 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細(xì)胞 激酶和磷酸酶

    動(dòng)植物總蛋白微量提取試劑盒50 次品牌Anti-Mammaglobin A蛋白分子量  predicted molecular weight: 37kDa

    鈷柱介質(zhì)10mL哪里有賣Anti-Myosin-XVIIIb研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) G蛋白偶聯(lián)受體 淋巴細(xì)胞

    磷酸化蛋白富集試劑盒10 次多少錢Anti-MEOX 2研究領(lǐng)域  發(fā)育生物學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 生長因子和激素 細(xì)胞骨架

    5-氮胞苷/阿扎胞苷(標(biāo)準(zhǔn)品)proCNP/NPPC (pro-natriuretic peptide)  促尿鈉排泄肽前體C抗原TIRAP  白細(xì)胞介素1受體銜接蛋白抗體

    鹽酸氮卓斯汀NPY2R(Neuropeptide Y Receptor Type 2)  神經(jīng)肽Y受體2(多肽)TIP47/M6PRBP1  脂滴相關(guān)蛋白TIP47抗體

    鹽酸氮卓斯汀(標(biāo)準(zhǔn)品)NPY1R (neuropeptide Y1 receptor)  神經(jīng)肽Y1受體抗原TIP30  TIP30蛋白抗體

    阿奇霉素NQO1(NAD(P)H:quine oxidoreductase l)  醌氧化還原酶抗原TIMP-4  金屬蛋白酶組織抑制因子-4抗體

    阿奇霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)NR1/NMDAR1(N-Methyl-d-Asprtate receptor 1)  谷氨酸受體1(多肽)TIMP-3  金屬蛋白酶組織抑制因子-3抗體

    氨曲南NR1/NMDAR1/GLUR1(N-Methyl-d-Asprtate receptor 1)  谷氨酸受體1抗原TIMP-2  金屬蛋白酶組織抑制因子-2抗體

    氨曲南(標(biāo)準(zhǔn)品)NR1/NMDAR1  谷氨酸受體1TIMP-1(NT)  金屬蛋白酶組織抑制因子-1抗體(N端)

    巴卡丁 IIINR2C/NMDAR2C(N-Methyl-d-Asprtate receptor 2C)  谷氨酸受體2C(多肽)TIMP-1(CT)  金屬蛋白酶組織抑制因子-1抗體(C端)

    巴卡丁 III(標(biāo)準(zhǔn)品)N-ras  原癌基因抗原TIMM17A  線粒體內(nèi)膜轉(zhuǎn)位酶抗體

    巴氯芬Nrf2 peptide  核因子2相關(guān)因子2抗原TIM4  T淋巴細(xì)胞膜蛋白4抗體
    支原體通用PCR檢測試劑盒價(jià)格人白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT13.5×15cm/張

    人白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:50張

    人白介素2(IL-2)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT100張

    人白介素23(IL-23)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT25克

    人白介素27(IL-27)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT500克

    人白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT,避光5克

    人白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT10克

    人白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:500克
    檢測步驟:
    一、 試劑的準(zhǔn)備
    從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
    設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表:
    試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
    熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
    酶混合物 1 µL N×1 µL
    總量 15 µL N×15µL
    1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
    7.2 qPCR反應(yīng)條件
    將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
    推薦循環(huán)條件:
    1循環(huán) 50℃ for 2 min
    預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
    PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
    60℃ for 60 sec
    60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

     

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