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    沙眼衣原體PCR檢測試劑盒廠家

    產(chǎn)品簡介

    體開放閱讀框103抗體Cannabidiol中文名:別名:CBD分子式:C21H30O2

    細胞角蛋白15抗體Evofolin B中文名:別名:分子式:C17H18O6

    平滑肌鈣調(diào)蛋白CNN2抗體3-

    更新時間:2021-03-13
    訪問次數(shù):474
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    組成及試劑配制:
    1、酶標板:一塊(96孔)
    2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
    3、 樣品稀釋液:1×20ml。
    4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
    5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
    注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

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     產(chǎn)品名稱

     沙眼衣原體PCR檢測試劑盒廠家

     規(guī)格

     50T

     貨號

     LZP7802

    實驗過程:
    一、試劑準備
    1. DNA模板
    2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
    3.10×PCR Buffer
    4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
    5.Taq酶
    二、操作步驟
    1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
    dNTP mixl                 4μl
    引物1(10pM)               2μl
    引物2(10PM)              2μl
    Taq酶(2U/μl)            1μl
    DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
    ddH2O至               50 μl
    PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
    2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
    3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
    4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
    三、注意事項
    1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設(shè)立一個的PCR實驗室。
    2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
    3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
    4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
    5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
    6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
    7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
    一、 試劑的準備
    從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
    設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
    試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
    熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
    酶混合物 1 µL N×1 µL
    總量 15 µL N×15µL
    1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
    7.2 qPCR反應(yīng)條件
    將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
    推薦循環(huán)條件:
    1循環(huán) 50℃ for 2 min
    預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
    PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
    60℃ for 60 sec
    60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設(shè)置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
    對硝(分析標準品,用于環(huán)境分析)Phospho-Src (Tyr527) AntibodyN,N'-二咪唑基二酰

    對硝標準溶液(1000μg/ml,溶劑:甲)Hexokinase II Antibody6-羥基-5-正癸酮

    對硝標準溶液(1.04mg/ml,基體:甲)Non-phospho-Src (Tyr527) Antibody(S,S)-雙[(2-甲氧基基)基]烷

    辛酮(Standard for GC, ≥99.5% (GC))Non-phospho-Src (Tyr527) Antibody2-甲基-庚酮

    1-十八(標準品)Src Antibody甲基-2-吡咯羧酸酯

    (標準品)Src (36D10) Rabbit mAb環(huán)烷酸鋅

    十八烷(標準品)Src (36D10) Rabbit mAbΑ,Α'-二基對二甲

    2-辛酮(標準品)Src (L4A1) Mouse mAb1,二基-2--1-酮

    對羥基聯(lián)(標準品)Phospho-Mnk1 (Thr197/202) Antibody5-甲基-2-呋喃甲酸酯

    鄰二甲酸二己酯(標準品)Cycloheximide5-甲基-異噁唑羧酸酯

    五酚標準溶液(濃度范圍:776(mg/L),分析標準品)Rictor (53A2) Rabbit mAb銅-PAN絡(luò)合物(CU-EDTA+PAN)

    氧酸(標準品)Rictor (53A2) Rabbit mAb3,3'-二氟聯(lián)

    2-基酚(標準品)SRC-3 (11B1) Mouse mAb2,6-二溴甲酸

    正戊(分析標準品,≥99.8%(GC))β-Tubulin (9F3) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 555 Conjuga)1,3,6,8-四溴芘

    菲標準溶液(395μg/mL,基體:甲)RhoA (67B9) Rabbit mAb7-甲氧基-磺酰-1(3H)-異并呋喃酮

    (標準品)RhoA (67B9) Rabbit mAbchloro-methoxytoluene

    五酚標準溶液(1.00mg/ml,基體:甲)GAPDH (14C10) Rabbit mAb2--1,二硫酸鹽

    吡啶(標準品)GAPDH (14C10) Rabbit mAb吡啶-2-羧硫酸

    β-連環(huán)蛋白(CTNNB1/CTNNB/OK/SW-cl.35/PRO2286)ELISA試劑盒LAMA3/Laminin 5 alpha 3  層粘蛋白α3100 ul

    β膠原交聯(lián)(bCTx)ELISA試劑盒Beta-lactoglobulin  β-球蛋白100 ul

    β-肌動蛋白(β-actin)ELISA試劑盒Beta-lactoglobulin  β-球蛋白100 ul

    β-黑色素細胞刺激素(β-MSH)ELISA試劑盒Beta-lactoglobulin  β-球蛋白100 ul

    β甘露糖苷酶(β Manase)ELISA試劑盒LAG-3/CD223  淋巴細胞活化基因-3100µl

    β-防御素3 ELISA試劑盒Langerin/CD207  白細胞分化抗原CD207100 ul

    β-防御素2 ELISA試劑盒LAP18/Stathmin  白血病相關(guān)蛋白18/癌蛋白1820 ul

    β防御素104(DEFB104A)ELISA試劑盒Phospho-Stathmin (Ser16)  酸化原癌基因蛋白18500 ul

    β-防御素1(DEFB1)ELISA試劑盒Phospho-Stathmin (Ser38)  酸化原癌基因蛋白18100 ul
    沙眼衣原體PCR檢測試劑盒廠家12號染色體開放閱讀框68抗體Hirsutal 5-O-glucoside中文名:別名:分子式:C25H32O11

    1號染色體開放閱讀框103抗體Cannabidiol中文名:別名:CBD分子式:C21H30O2

    細胞角蛋白15抗體Evofolin B中文名:別名:分子式:C17H18O6

    平滑肌鈣調(diào)蛋白CNN2抗體3-O-Methylducheside A中文名:別名:3,8-Di-O-methylellagic acid 2-O-xyloside分子式:C21H18O12

    心肌病相關(guān)蛋白2Veratraldehyde中文名:3,4-二甲氧基別名:3,4-Dimethoxybenzaldehyde分子式:C9H10O3

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