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    嗜肺軍團菌PCR檢測試劑盒廠家

    產品簡介

    櫻黃素別名:Isoprunetin分子式:C16H12O5

    乙酰膽堿酶抗體Cinchonain IIa中文名:金雞納素IIa別名:分子式:C39H32O15

    通道蛋白-7抗體Calycosin 7-O-β-D-glucopyraside中文名:毛蕊異黃酮

    更新時間:2021-03-13
    訪問次數:502
    詳細介紹在線留言

    注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

     產品名稱

     嗜肺軍團菌PCR檢測試劑盒廠家

     規格

     50T

     貨號

     LZP7810

    組成及試劑配制:
    1、酶標板:一塊(96孔)
    2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
    3、 樣品稀釋液:1×20ml。
    4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
    5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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    實驗過程:
    一、試劑準備
    1. DNA模板
    2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
    3.10×PCR Buffer
    4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
    5.Taq酶
    二、操作步驟
    1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
    dNTP mixl                 4μl
    引物1(10pM)               2μl
    引物2(10PM)              2μl
    Taq酶(2U/μl)            1μl
    DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
    ddH2O至               50 μl
    PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
    2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
    3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
    4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
    三、注意事項
    1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
    2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
    3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
    4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
    5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
    6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
    7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
    仲丁(Standard for GC,≥99.8%(GC))Mnk1 (C4C1) Rabbit mAb(R)-1,2-

    (Standard for GC,>99.5%(GC))ESET (C1C12) Rabbit mAb4,二甲基環己酮

    1,丁二(BDO)(standard for GC,≥99%(GC))ESET (C1C12) Rabbit mAb6-尿嘧啶

    正丁酸(Standard for GC,>99.5%(GC))Phospho-Chk2 (Thr68) (C13C1) Rabbit mAb叔丁基馬來酸酯

    正丁(Standard for GC,≥99.7%(GC))Phospho-Chk2 (Thr68) (C13C1) Rabbit mAb2-環戊基-2-羥基

    (Standard for GC)RPA70/RPA1 (4D9) Rat mAb4,6-二-1H-吡唑并[3,C]嘧啶

    甲酸丁酯(Standard for GC, ≥99.5% (GC))MRPL11 Antibody溴-甲酸

    二二丁(standard for GC,≥99.5%(GC))Etoposide2-(甲?;?-

    甲基酸丁酯(Standard for GC,>99.5%(GC))Naked1 (C30F10) Rabbit mAb2-溴-4甲基芐

    酸叔丁酯(standard for GC,≥99.5%(GC)Naked1 (C30F10) Rabbit mAb溴-甲

    己酸丁酯(standard for GC,≥99.5%(GC))Caspase-12 Antibody2-溴-5-

    2-丁酮(Standard for GC, ≥99.9% (GC))Caspase-12 Antibody2-氨基-甲氧基甲酸

    戊酸丁酯(Standard for GC, ≥99.5% (GC))TCF1/TCF7 (C63D9) Rabbit mAb-6-甲氧基喹啉

    (standard for GC,≥99.9%(GC))TCF1/TCF7 (C63D9) Rabbit mAb溴-1,1,1-三氟酮

    酸丁酯(standard for GC,≥99.7%(GC))Borzomib4,6-二-5-甲基嘧啶

    1,2,丁三(BT)(standard for GC,≥99.5%(GC))Jagged2 (C83A8) Rabbit mAb對二三氟甲

    (standard for GC,>99.5%(GC))TCF1/TCF7 (C46C7) Rabbit mAb氟-5-溴酚

    環己烷(Standard for GC,≥99.9%(GC))Shh (C9C5) Rabbit mAb1,2-雙(三氟甲基)

    αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA試劑盒LIFR/CD118  白血病抑制因子受體100 ul

    α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA試劑盒Lingo-1  Nogo受體反應蛋白1 Kit

    α2巨球蛋白(α2-MG)ELISA試劑盒LIMK1  單絲氨酸蛋白激酶1100 ul

    α2-HS糖蛋白(AHSG)ELISA試劑盒Phospho-LIMK1 (Thr508)/LIMK2 (Thr505)  酸化單絲氨酸蛋白激酶1/2100 ul

    α1微球蛋白/bikunin前體(AMBP)ELISA試劑盒LIR-6  白細胞免疫球蛋白樣受體6100µl

    α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒LIR-8/CD85c/LILRB5  白細胞免疫球蛋白樣受體8500 ul

    α1抗胰糜蛋白酶(AACT)ELISA試劑盒LIS1  無腦回的致病基因LIS1100 ul

    α1抗胰蛋白酶(α1-AT)ELISA試劑盒LILRB3/CD85a/PirB  白細胞免疫球蛋白樣受體-B20 ul

    α1防御素(DEFA1)ELISA試劑盒LIX1  LIX15 mg
    嗜肺軍團菌PCR檢測試劑盒廠家銜接因子蛋白含pH域蛋白1抗體Afzelechin-(4α→8)-epiafzelechin中文名:別名:分子式:C30H26O10

    AIMP2抗體5-O-Methylgenistein中文名:異櫻黃素別名:Isoprunetin分子式:C16H12O5

    乙酰膽堿酶抗體Cinchonain IIa中文名:金雞納素IIa別名:分子式:C39H32O15

    通道蛋白-7抗體Calycosin 7-O-β-D-glucopyraside中文名:毛蕊異黃酮苷別名:Calycosin 7-glucoside; Calycosin 7-O-glucoside分子式:C22H22O10

    谷丙氨酸氨基轉移酶1抗體3'-Methoxydaidzin中文名:3'-甲氧基大豆苷別名:分子式:C22H22O10
    檢測步驟:
    一、 試劑的準備
    從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
    設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
    試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
    熒光PCR反應液 14µL N×14µL
    酶混合物 1 µL N×1 µL
    總量 15 µL N×15µL
    1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
    7.2 qPCR反應條件
    將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
    推薦循環條件:
    1循環 50℃ for 2 min
    預變性 1循環 95℃ for 10 min
    PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
    60℃ for 60 sec
    60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

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