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    鼠疫桿菌PCR檢測試劑盒規格

    產品簡介

    羥基-嘧啶甲酸

    1,2-(standard for GC, ≥99.5% (GC))Phospho-HER2/ErbB2 (Tyr1221/1222) Antibody溴-5-硝基三氟甲

    仲戊(standard for GC,≥99.5%(GC))c-Fos (9F6) Rabbit mAb1-(吡啶基)酮

    Toll樣受體7(TLR7)ELISA試劑盒L

    更新時間:2021-03-13
    訪問次數:479
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    注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

     產品名稱

     鼠疫桿菌PCR檢測試劑盒規格

     規格

     50T

     貨號

     LZP7812

    實驗過程:
    一、試劑準備
    1. DNA模板
    2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
    3.10×PCR Buffer
    4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
    5.Taq酶
    二、操作步驟
    1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
    dNTP mixl                 4μl
    引物1(10pM)               2μl
    引物2(10PM)              2μl
    Taq酶(2U/μl)            1μl
    DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
    ddH2O至               50 μl
    PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
    2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
    3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
    4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
    三、注意事項
    1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
    2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
    3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
    4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
    5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
    6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
    7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
    一、 試劑的準備
    從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
    設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
    試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
    熒光PCR反應液 14µL N×14µL
    酶混合物 1 µL N×1 µL
    總量 15 µL N×15µL
    1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
    7.2 qPCR反應條件
    將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
    推薦循環條件:
    1循環 50℃ for 2 min
    預變性 1循環 95℃ for 10 min
    PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
    60℃ for 60 sec
    60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
    組成及試劑配制:
    1、酶標板:一塊(96孔)
    2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
    3、 樣品稀釋液:1×20ml。
    4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
    5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
    鄰硝(Standard for GC, ≥99.5% (GC))Phospho-EGF Receptor (Tyr1068) (1H12) Mouse mAb2-異煙酸甲酯

    對硝(standard for GC,≥99.5%(GC))Phospho-EGF Receptor (Tyr1045) Antibody間溴

    間硝(Standard for GC)Phospho-EGF Receptor (Tyr1045) Antibody甲氧基酮

    正壬(Standard for GC,≥99.5%(GC))Phospho-EGF Receptor (Ser1046/1047) Antibody溴甲酰

    壬酸(Standard for GC ,>99%(GC))EGF Receptor (1F4) Mouse mAb基

    (Standard for GC,≥99.8%(GC))PU.1 (9G7) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)二基溴化鎂

    正辛烷(Standard for GC,≥99.5%(GC))Phospho-HER2/ErbB2 (Tyr877) Antibody2--氨基-5-溴吡啶

    正辛(Standard for GC,>99.5%)HER2/ErbB2 Antibody酸異冰片酯

    正辛酸(Standard for GC,≥99.5%(GC))HER2/ErbB2 Antibody基溴

    十八烷(Standard for GC, ≥99.5% (GC))Phospho-HER2/ErbB2 (Tyr1221/1222) (6B12) Rabbit mAb2--氟異煙酸

    仲辛(Standard for GC,≥99.5%(GC))Phospho-HER2/ErbB2 (Tyr1221/1222) (6B12) Rabbit mAb叔丁基磺酰

    二十八烷(standard for GC,≥98.5%(GC))Phospho-HER2/ErbB2 (Tyr1221/1222) (6B12) Rabbit mAb1,7-庚二

    草酸(Standard for GC,≥99.6%)Phospho-HER2/ErbB2 (Tyr1248)/EGFR (Tyr1173) Antibody2-肼鹽酸鹽

    丁酸酯(Standard for GC, ≥99.5% (GC))Phospho-HER2/ErbB2 (Tyr1248) Antibody肼酸甲酯

    (Standard for GC,>99%(GC))Phospho-HER2/ErbB2 (Tyr1248) Antibody2--5-羥基三氟甲

    (standard for GC,>99.5%(GC))HER2/ErbB2 (44E7) Mouse mAb6-羥基-嘧啶甲酸

    1,2-(standard for GC, ≥99.5% (GC))Phospho-HER2/ErbB2 (Tyr1221/1222) Antibody溴-5-硝基三氟甲

    仲戊(standard for GC,≥99.5%(GC))c-Fos (9F6) Rabbit mAb1-(吡啶基)酮

    Toll樣受體7(TLR7)ELISA試劑盒Lpin1 proin  Lpin1 20 ul

    Toll樣受體6(TLR6)ELISA試劑盒Lpin1 proin  Lpin1 100 ul

    Toll樣受體5(TLR5)ELISA試劑盒LPL/PLASTIN2  脂蛋白脂酶100 ul

    Toll樣受體4(TLR4)ELISA試劑盒LPLUNC1  鼻咽癌癌基因100 ul

    Toll樣受體3(TLR3)ELISA試劑盒LRIG1  LRIG1100 ul

    Toll樣受體2(TLR2)ELISA試劑盒LRIG2  LRIG2100 ul

    Toll樣受體1(TLR1)ELISA試劑盒LRIG3  LRIG320 ul

    TH糖蛋白(THP)ELISA試劑盒LRP/MVP  肺耐藥相關蛋白100 ul

    TGF-β誘導早期基因1(TIEG1)ELISA試劑盒LRP1/CD91  低密度脂蛋白相關受體1100µl
    鼠疫桿菌PCR檢測試劑盒規格芳基硫酸酯酶A抗體Ambocin中文名:染料木素-7-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→6)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷別名:Genistein 7-O-β-D-apiofurasyl-(1→6)-O-β-D-glucopyraside分子式:C26H28O14

    植物延長蛋白(擬南芥)(-)-Sativan中文名:別名:分子式:C17H18O4

    擬南芥ACA11抗體7,3',4'-Tri-O-methyleriodictyol中文名:5-羥基-7,3',4'-*氧基二氫黃酮別名:5-Hydroxy-7,3',4'-trimethoxyflavane分子式:C18H18O6

    AHA3抗體(擬南芥)Alpine 3-acetate中文名:別名:Alpine 3-O-acetate分子式:C18H16O6

    A-Raf抗體Afzelechin 3-O-xyloside中文名:阿夫兒茶精-3-O-木糖苷別名:分子式:C20H22O9

     

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