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    小反芻獸RT-PCR檢測試劑盒廠家

    產品簡介

    喹噁啉(標準品)SPAR (D9P9T) Rabbit mAb甲酸酯

    磺吡(標準品)PP1α Antibody硫酸阿托品

    泰妙菌素(標準品)GLI2 (R770) Antibody2,5-二對二甲

    甲酸銨(用于質譜,≥99.0%)IGFBP3 (D1U9C) Rabbit mAb2-溴噻唑-甲酸酯

    甲(色譜級, ≥99.5%(GC))PCNA (PC10) Mouse mAb2-羥基-甲基

    更新時間:2021-03-13
    訪問次數:544
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    組成及試劑配制:
    1、酶標板:一塊(96孔)
    2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
    3、 樣品稀釋液:1×20ml。
    4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
    5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
    注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

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     產品名稱

     小反芻獸RT-PCR檢測試劑盒廠家

     規格

     50T

     貨號

     LZP7838

    實驗過程:
    一、試劑準備
    1. DNA模板
    2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
    3.10×PCR Buffer
    4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
    5.Taq酶
    二、操作步驟
    1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
    dNTP mixl                 4μl
    引物1(10pM)               2μl
    引物2(10PM)              2μl
    Taq酶(2U/μl)            1μl
    DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
    ddH2O至               50 μl
    PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
    2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
    3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
    4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
    三、注意事項
    1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
    2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
    3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
    4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
    5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
    6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
    7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
    一、 試劑的準備
    從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
    設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
    試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
    熒光PCR反應液 14µL N×14µL
    酶混合物 1 µL N×1 µL
    總量 15 µL N×15µL
    1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
    7.2 qPCR反應條件
    將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
    推薦循環條件:
    1循環 50℃ for 2 min
    預變性 1循環 95℃ for 10 min
    PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
    60℃ for 60 sec
    60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
    1,2,4,5-四(NMR定量標準品,99.8%(GC))Acetyl-Histone H2A (Lys5) Antibody2-氟-溴

    熔點標準品(+235 to +237℃)Phospho-Histone H2A.X (Ser139) Antibody2-基-4'-甲基聯

    1,(標準品)Phospho-Histone H2A.X (Ser139) Antibody1-Boc-羥甲基吡咯烷

    二硫化四甲基秋蘭姆(標準品)Histone H2A Antibody II()戊二酸單酰

    正己烷標準溶液(1000μg/ml,基體:甲)GIRK2 (D6C2T) Rabbit mAb2-氟-吡啶

    順式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六酸(標準品)Ribosomal Proin S3 Antibody(2R)-(-)-縮水甘油基對甲磺酸酯

    二甲硝咪唑(標準品)MAGE-A3 Antibody4,6-二甲氧基-2-甲磺酰基嘧啶

    N-(2-羥基)二-N,N′,N′-三酸 三鈉鹽 溶液(~41% in H2O (T))Keratin 5 (D4U8Q) Rabbit mAb4,4'-二甲基-2,2'-聯吡啶

    青霉素V(標準品)Phospho-Stat1 (Tyr701) (D4A7) Rabbit mAb (PE Conjuga)2,二氟芐基溴

    2-NP-AOZ(標準品)Phospho-IRS-1 (Ser332/336) Antibody基甲酸甲酯

    磺醋酰(標準品)Phospho-PP1α (Thr320) Antibody3,二氟肉桂酸

    磺喹噁啉(標準品)SPAR (D9P9T) Rabbit mAb甲酸酯

    磺吡(標準品)PP1α Antibody硫酸阿托品

    泰妙菌素(標準品)GLI2 (R770) Antibody2,5-二對二甲

    甲酸銨(用于質譜,≥99.0%)IGFBP3 (D1U9C) Rabbit mAb2-溴噻唑-甲酸酯

    (色譜級, ≥99.5%(GC))PCNA (PC10) Mouse mAb2-羥基-甲基吡啶

    甲基叔丁基(農殘級,≥99.9%(GC))PCNA (PC10) Mouse mAb二氨基藍 BB

    甲基叔丁基(GC,≥99.9%(GC))TORC1/CRTC1 (C71D11) Rabbit mAb茉莉酸

    B細胞活化因子(BAFF)ELISA試劑盒MuRF1/Trim63  肌肉細胞特異性泛素蛋白連接酶1100 ul

    B細胞κ 輕肽基因增強子核因子抑制因子ε(NFKBIE)ELISA試劑盒MyD88  髓樣分化蛋白20 ul

    B群鏈球菌多糖(IgG)ELISA試劑盒NIPP1/ARD1  核抑制蛋白酸酶1100 ul

    B-淋巴細胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)ELISA試劑盒Myelin Proin Zero   外周髓脂P0蛋白/P0蛋白100 ul

    B淋巴細胞抗原(CD20)ELISA試劑盒PMP2  周圍神經髓鞘蛋白2100 ul

    blca-4 ELISA試劑盒MYSM1  MYSM1100 ul

    blca-1 ELISA試劑盒MYOZ/MYOZ1  MYOZ100 ul

    Bcl-2樣蛋白1(BCL2L1)ELISA試劑盒MyoD1/Myf3  肌原調節蛋白100 ul

    B7-H4 ELISA試劑盒SM Myosin (Smooth Muscle)  心肌肌凝蛋白(平滑肌) 單抗20 ul
    小反芻獸RT-PCR檢測試劑盒廠家骨涎蛋白Chrysosplel D中文名:貓眼草酚別名:分子式:C18H16O8

    腦和急性白血病胞漿蛋白抗體Sepil中文名:別名:分子式:C16H14O7

    骨髓基質干細胞抗原2抗體Fustin中文名:黃顏木素別名:Dihydrofisetin分子式:C15H12O6

    環指蛋白47抗體Hydroxygenkwanin中文名:羥基芫花素別名:7-O-Methylluteolin分子式:C16H12O6

    BEN結構域蛋白5抗體Dihydrorobinetin中文名:別名:分子式:C15H12O7

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