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    當前位置:首頁  -  產品中心  -  PCR試劑盒  -  熒光-PCR法  -  48T牛結核分歧桿菌(MB)核酸試劑盒規格

    牛結核分歧桿菌(MB)核酸試劑盒規格

    產品簡介

    白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒 Beta-Amyloid 1-42 CT(A Beta1-42)/FITC 熒光素標記β淀粉樣肽1-42 (C端)IgG100&#181;l

    倉鼠白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒 Beta-Amyloid(25-35)/FITC 熒光素標記β淀粉樣肽(25-35)IgG100 ul

    倉鼠γ干擾素(IFNG)ELISA試劑盒B

    更新時間:2021-03-13
    訪問次數:700
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    注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

     產品名稱

     牛結核分歧桿菌(MB)核酸試劑盒規格

     規格

     48T

     貨號

     LZP8004

    組成及試劑配制:
    1、酶標板:一塊(96孔)
    2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
    3、 樣品稀釋液:1×20ml。
    4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
    5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
    ?
    實驗過程:
    一、試劑準備
    1. DNA模板
    2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
    3.10×PCR Buffer
    4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
    5.Taq酶
    二、操作步驟
    1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
    dNTP mixl                 4μl
    引物1(10pM)               2μl
    引物2(10PM)              2μl
    Taq酶(2U/μl)            1μl
    DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
    ddH2O至               50 μl
    PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
    2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
    3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
    4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
    三、注意事項
    1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
    2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
    3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
    4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
    5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
    6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
    7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
    酰吡啶ATP2A2/SERCA2 Antibody炔基噻吩

    鹽酸曲美他NFAT1 Antibody2-已

    膠原蛋白(I型)ACTL6/BAF53 Antibody惡唑-2-羧酸

    維替泊芬MTH1 (D6V4O) Rabbit mAb2-羥基-甲氧基甲

    Biotin HPDP;N-(6-[生物素]己基)-3'-(2'-吡啶二硫)酰Gephyrin (D4J4R) Rabbit mAb二酮

    膠原蛋白(BR)PIAS4 (D2F12) Rabbit mAb3,5-二酸

    右雷佐生;右亞PIAS4 (D2F12) Rabbit mAb氟-三氟甲

    A 801;A801FTH1 (D1D4) Rabbit mAb溴-2,6-二氟

    Amresco 進分瓊脂粉β-TrCP (D13F10) Rabbit mAb反-(1R,2R)-N,N'-二甲基1,2-環己烷二

    氟伏沙明Tri-Methyl-Histone H3 (Lys27) (C36B11) Rabbit mAb (Biotinylad)五碳糖

    呋喃西林SP (23E5) Mouse mAb基-4,10-二羥基-1H-吡喃[3',4':6,7]吲哚[1,2-B]喹啉-3,14(4H,12H)-二酮

    呋喃西林(標準品)RBX1 Antibody二甲基砜

    醋酸鋅(二水)Di-Methyl-Histone H3 (Lys27) (D18C8) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)叔丁基化鎂

    舒巴坦鈉MSL2 (D4V2N) Rabbit mAb芐氧基溴

    舒巴坦鈉(標準品)MIB1 Antibody1-(溴基)哌鹽酸鹽

    頭孢噻吩鈉Crizotinib(S)-(-)-羥基-2-吡咯烷酮

    甘草次酸(β型),18beta-甘草次酸FoxP1 (D35D10) XP® Rabbit mAb(溴甲基)酸

    甘草次酸(β型),18beta-甘草次酸(標準品)FoxP1 (D35D10) XP® Rabbit mAb5-甲基咪唑-甲

    倉鼠二(MDA)ELISA試劑盒 Beta-Amyloid(1-16) /FITC  熒光素標記β淀粉樣肽(1-16)IgG100 ul

    倉鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒Beta-Amyloid(1-28)/FITC  熒光素標記β淀粉樣肽(1-28)IgG300 ul

    倉鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒 Beta-Amyloid(1-40)/FITC  熒光素標記β淀粉樣肽(1-40)IgG100 ul

    倉鼠白介素3(IL-3)ELISA試劑盒Beta-Amyloid 1-40(CT)/FITC  熒光素標記β淀粉樣肽(1-40)C端IgG20 ul

    倉鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒 Beta-Amyloid 1-40(CT)mouse/FITC  熒光素標記β淀粉樣肽 1-40 C端IgG100 ul

    倉鼠白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒 Beta-Amyloid 1-42 CT(A Beta1-42)/FITC  熒光素標記β淀粉樣肽1-42 (C端)IgG100µl

    倉鼠白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒 Beta-Amyloid(25-35)/FITC  熒光素標記β淀粉樣肽(25-35)IgG100 ul

    倉鼠γ干擾素(IFNG)ELISA試劑盒Beta-Amyloid(31-35)/FITC  熒光素標記β淀粉樣肽(31-35)IgG300 ul

    倉鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒14-3-3/FITC  熒光素標記14-3-3蛋白IgG100 ul
    牛結核分歧桿菌(MB)核酸試劑盒規格21號染色體開放閱讀框33抗體Broussonin A中文名:別名:分子式:C16H18O3

    CRTAM抗體Broussonin B中文名:別名:分子式:C16H18O3

    心肌肌鈣蛋白抗體Furan-2-carboxylic acid中文名:別名:分子式:C5H4O3

    多配體蛋白聚糖1抗體1,2-Benzenediol中文名:鄰苯二酚別名:分子式:C6H6O2

    T細胞特異性趨化因子抗體Pyrogallol中文名:鄰苯三酚別名:Pyrogallic acid分子式:C6H6O3
    檢測步驟:
    一、 試劑的準備
    從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
    設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
    試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
    熒光PCR反應液 14µL N×14µL
    酶混合物 1 µL N×1 µL
    總量 15 µL N×15µL
    1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
    7.2 qPCR反應條件
    將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
    推薦循環條件:
    1循環 50℃ for 2 min
    預變性 1循環 95℃ for 10 min
    PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
    60℃ for 60 sec
    60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

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