iNOS誘導型一氧化合成酶ELISA試劑盒

服務：

公司產(chǎn)品僅用于科研我們可以根據(jù)您的應用需要，比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求，而量身定制檢測試劑盒，有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。

試劑盒組成及試劑配制 ：

1. 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。

2. 標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。

3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4. 標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6. 標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7. 辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

樣品準備：

1）血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2）血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3）細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4）組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液

5）保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

使用方法：

測定法的靈敏度來自作為報告的酶。酶是一種有機催化劑，很少量的酶即可誘導大量的催化反應，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。

1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。   24μg/ml    5號標準品    150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

12μg/ml    4號標準品    150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

6μg/ml     3號標準品    150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

3μg/ml     2號標準品    150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

1.5μg/ml   1號標準品    150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

2. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。|

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

熱休克蛋白70(HSP-70)試劑盒內(nèi)酯異 分析標準品，>99.7%(GC)DL-蘋果 AR，99.5%

熱休克蛋白70(HSP-70)試劑盒垂盆鈔草甙(治肝炎藥)，垂盆草甙異 >99.0% (GC)(含100ppm BHT穩(wěn)定劑)L-蘋果 98%

熱休克蛋白40(HSP-40)試劑盒垂石松 A異佛爾 97%L-蘋果 CP

熱休克蛋白40(HSP-40)試劑盒槐雙氫黃異 ACS, ≥99.5% 順二 AR,99.5%

熱休克蛋白20(HSP-20)試劑盒槐亭烯異癸酯 98%,含70-100ppm對苯二酚穩(wěn)定劑順二 CP,99%

熱休克蛋白20(HSP-20)試劑盒桐阿亭烯月桂酯 96%順二 藥用級，EP,USP

肌球蛋白(MYS)試劑盒桐酚素α-烯 >99.0%(GC),250ppm MEHQ做穩(wěn)定劑D-蘋果 99%

肌球蛋白(MYS)試劑盒桐特靈α-烯 >99.0%(GC),250ppm MEHQ做穩(wěn)定劑單硬脂甘油酯 >60.0%(GC)

凝溶膠蛋白(GS)試劑盒五加甙 C異丁(MIBC)  99%單硬脂甘油酯 99%(GC)

凝溶膠蛋白(GS)試劑盒粗毛甘草素 A乙酰乙酯 CP，98%L-半胱氨 ≥98%,非動物源，用于培養(yǎng)

C反應蛋白(CRP)試劑盒粗毛羊藿異丁 >99.5%(GC)安息香 99.5%

C反應蛋白(CRP)試劑盒醋獨活屬壬酚 GR聯(lián)苯酰 99.0%

固(ALD)試劑盒達瑪二烯乙酯壬酚(混合物) SU安息香二 99%

固(ALD)試劑盒達瑪烯二II壬酚 分析標準品1-羥環(huán)己苯 98%

肌紅蛋白(MYO/MB)試劑盒大豆腦 I對壬酚 85%2-羥-2- 97%

肌紅蛋白(MYO/MB)試劑盒大豆腦 II對壬酚 98%乙(95%) AR,95.0%
iNOS誘導型一氧化合成酶ELISA試劑盒熒光標記是研究細胞凋亡的基本方法。細胞凋亡的形態(tài)學變化及生化學變化都可以通過熒光標記的的方法而檢測出來，從而區(qū)別鑒別出正常細胞、壞死細胞或檢測細胞周期。

碘化丙啶（Propidium Iodide, PI）是一種DNA 結合性染料，其激發(fā)和發(fā)射波長分別為536nm 和617nm，產(chǎn)生紅色熒光，但無膜通透性，不能透過活細胞膜，只能染死細胞。因此，在熒光顯微鏡下觀察，正常細胞不能著色，壞死細胞呈強紅色熒光。采用流式細胞儀檢測細胞周期時，凋亡細胞因內(nèi)源性核酶被激活，使DNA 廣泛降解、斷裂，DNA 結構發(fā)生劇變，隨著凋亡的進程，DNA 斷裂產(chǎn)生的小分子量DNA 溢出胞外，細胞總DNA 量降低，于正常G0/G1 細胞群前出現(xiàn)一DNA 低染細胞群，即G1 峰前出現(xiàn)亞二倍體峰（sub-G1）或稱A0 細胞群，即凋亡細胞群。用本試劑盒的PI 直接對細胞DNA 染色后，進行流式細胞儀分析，即可檢測到凋亡細胞DNA 的變化。

儲存：2-8℃，避光，有效期6個月。

注意事項:

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。

3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4． 如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先將樣本稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)（×5×n）。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．本試劑不同批號組分不得混用。顯色劑B請避光保存。

7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。