CTSL1/CTSL組織蛋白酶L1ELISA試劑盒

樣品準(zhǔn)備：

1）血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2）血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3）細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4）組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液

5）保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

服務(wù)：

公司產(chǎn)品僅用于科研我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要，比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求，而量身定制檢測試劑盒，有效控制檢測試劑成本。并可提供免費(fèi)代測。

使用方法：

測定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶。酶是一種有機(jī)催化劑，很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng)，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。   24μg/ml    5號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

12μg/ml    4號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

6μg/ml     3號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

3μg/ml     2號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1.5μg/ml   1號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。|

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

注意事項(xiàng):

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4． 如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請先將樣本稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計(jì)算時(shí)請zui后乘以稀釋倍數(shù)（×5×n）。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．本試劑不同批號組分不得混用。顯色劑B請避光保存。

7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。

試劑盒組成及試劑配制 ：

1. 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。

2. 標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。

3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4. 標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6. 標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

巨噬炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)試劑盒丹參I葡萄糖 standard for GC, ≥99.5% (GC)間硝苯 GR,99.0%

巨噬炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)試劑盒丹參IIA葡萄糖 分析標(biāo)準(zhǔn)品對苯 AR,99.0%

巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)試劑盒丹參IIA-磺鈉胰高血糖素氫化物() ≥97.0% (HPLC)對苯 99.7%

巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)試劑盒丹參新羥萘酚藍(lán) IND,94%(HPLC)間苯 GR,99%

巨噬炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)試劑盒 丹酚A蘇木精 高純級,>99%（HPLC)間苯 CP

巨噬炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)試劑盒 丹酚B蘇木精 Biological stain間苯 分析標(biāo)準(zhǔn)品，>99.7%

巨噬炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)試劑盒丹酚B二酯分析標(biāo)準(zhǔn)品，用于顯微鏡,>99.5%（HPLC)，indicator (pH 5.0-6.0)  97%

巨噬炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)試劑盒丹酚CN-羥乙乙二-N，N′,N′-三乙 AR,99.0%1,1-二硫硝乙烯 98%

巨噬來源的趨化因子(MDC/CCL22)試劑盒丹酚D二十六烷  分析標(biāo)準(zhǔn)品, ≥99.5% (GC)2-溴-3-吡啶 97%

巨噬來源的趨化因子(MDC/CCL22)試劑盒丹寧七氟丁 離子色譜級5-溴-2-氟吡啶 98%

巨噬來源的趨化因子(MDC/CCL22)試劑盒丹皮酚DL-高半胱氨 95%(R)-(+)-N-叔丁氧羰-3-氨吡咯烷 97%

巨噬來源的趨化因子(MDC/CCL22)試劑盒丹皮酚磺鈉5-羥糠 分析標(biāo)準(zhǔn)品，>99%(s)-(-)-N-叔丁氧羰-3-氨吡咯烷 98%

巨噬集落激因子(M-CSF)試劑盒丹皮酚新苷1,2-十六烷二 95%代二苯膦 97%

巨噬集落激因子(M-CSF)試劑盒丹皮酚原苷正庚烷 Standard for GC,>99.5%(GC)5--2-氟吡啶 99%

單核趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)試劑盒丹葉大黃素8-羥喹啉-5-磺 水合物 98%二苯次膦酰 98%

單核趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)試劑盒單咖啡酰二十一烷 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥99.5% (GC)二苯磷 99%
CTSL1/CTSL組織蛋白酶L1ELISA試劑盒正常細(xì)胞/膜損傷細(xì)胞染色試劑盒是采用Calcein-AM/7-AAD 雙染細(xì)胞的方法染色活細(xì)胞和膜損傷細(xì)胞(死細(xì)胞)。

Calcein-AM 是一種可對活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的細(xì)胞染色試劑，Calcein-AM 由于在Calcein的基礎(chǔ)上加強(qiáng)了疏水性，因此能夠輕易穿透活細(xì)胞膜。當(dāng)其進(jìn)入到細(xì)胞質(zhì)后，酯酶會將其水解為Calcein 留在細(xì)胞內(nèi)，發(fā)出強(qiáng)綠色熒光。與其它同類試劑(如BCECF-AM和Carboxy-fluorescein diacetate)相比，Calcein-AM 是適合作為熒光探針去染活細(xì)胞的，因?yàn)樗募?xì)胞毒性很低。Calcein的激發(fā)和發(fā)射波長分別為490 nm和515 nm。Calcein -AM僅對活細(xì)胞染色。

7-AAD 是一種非滲透性熒光染料，作為核染色染料的7-AAD 不能穿過正常活細(xì)胞的細(xì)胞膜，但可穿透膜損傷細(xì)胞如晚期凋亡細(xì)胞或者壞死細(xì)胞的細(xì)胞膜，它穿過死細(xì)胞膜的無序區(qū)域而到達(dá)細(xì)胞核，并嵌入細(xì)胞的DNA 上，形成具有高熒光性的加成物，從而產(chǎn)生紅色熒光(激發(fā)：488，545nm，發(fā)射：647 nm)，因此7-AAD僅對膜損傷的死細(xì)胞染色。可以用來檢測膜損傷的無活性的細(xì)胞。

由于Calcein和7-AAD-DNA都可被490 nm激發(fā)，因此可用熒光顯微鏡同時(shí)觀察活細(xì)胞和膜損傷細(xì)胞。用545 nm 激發(fā)，僅可觀察到膜損傷細(xì)胞。

儲存條件：染料-20℃避光保存；避免反復(fù)凍融；稀釋液2-8℃保存。

有效期：六個月