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    SNU886細(xì)胞

    產(chǎn)品簡介

    SNU886細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:
    紅景天素Kanamycin 硫酸卡那霉素 Kanamycin (100mg/mL) 卡那霉素 P38蛋白表達(dá)熒光定量檢測試劑盒
    紅景天素Kanamycin 硫酸卡那霉素 Kanamycin (100mg/mL) 卡那霉素 PAR-1蛋白表達(dá)比色法定量檢測試劑盒

    更新時(shí)間:2021-08-30
    訪問次數(shù):984
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    產(chǎn)品名稱:肝癌細(xì)胞
    英文簡稱:SNU886細(xì)胞

    貨號:LZ-X969894
    規(guī)格:T25
    生長特性:貼壁

    圖片2.jpg 

    凍存培養(yǎng)基:
    凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
    1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
    2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
    培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
    以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
    1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
    2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
    3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
    4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細(xì)胞沉淀。
    注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
    5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
    6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
    7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低  1°C。或者,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

    圖片2.jpg 

    實(shí)驗(yàn)材料: 
    1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶 
    2. 100ml滅菌燒杯2個;
    3、50ml離心筒2個 
    4、滅菌培養(yǎng)皿1個,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 
    5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個 
    6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊; 
    7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把; 
    8、酒精燈1臺;

    實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
    一、分離與培養(yǎng):
       1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;
       2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
       3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
       4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
       5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
    二、免疫熒光鑒定:
       1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
       2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
       3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
       4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
       5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
       6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微
    鏡下觀察圖像并拍照。

    66485/硝酸纖維素膜[0.22u] 30cm*3m (PALL)Lignin alkalie 堿性木質(zhì)素體液單氧化酶B型(MAO-B)活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒

    710932/大容量電動移液器[1-100ml](Dragonmed)Brilliant Cresyl Blue 燦爛甲酚藍(lán)/煌焦油藍(lán)/亮甲體液單氧化酶B型(MAO-B)活性熒光定量檢測試劑盒

    728001/大容量手動移液器[1-100ml](Dragonmed)D-Panthenol D-泛體液蛋白巰基/結(jié)合巰基含量比色法定量檢測試劑盒

    4612/25mm,0.22u一次性針頭式濾器(PALL)Cholic acid 膽酸體液蛋白巰基/結(jié)合巰基含量熒光定量檢測試劑盒

    4612/25mm,0.22u一次性針頭式濾器(PALL)Cholic acid 膽酸體液低密度脂蛋白膽固(LDL-Cholesterol)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒

    4614/25mm,0.45u一次性針頭式濾器(PALL)Rhodamine B 羅丹明B體液丁酰膽堿酯酶活性比色法定量檢測試劑盒

    4614/25mm,0.45u一次性針頭式濾器(PALL)Rhodamine B 羅丹明B體液丁酰膽堿酯酶活性比色法定量檢測試劑盒

    RPN303B/N+尼龍膜[15cm*20cm 0.45u](Amersham[分])Glycero 2-phosphate disodium salt β-甘油磷酸鈉體液丁酰膽堿酯酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒

    RPN303B/N+尼龍膜[15cm*20cm 0.45u](Amersham[分])8-Anilino-1-naphthalenesulfonic acid/ANSA8-苯-1-萘磺酸 體液丁酰膽堿酯酶活性熒光定量檢測試劑盒

    RPN303B/N+尼龍膜[30cm*3m 0.45u](Amersham)1-Naphth 1 acetate 乙酸-1-奈脂   進(jìn)分體液多氧化酶(PAO)活性比色法定量檢測試劑盒

    ISEQ00010/PVDF膜轉(zhuǎn)印膜[疏水膜,膜孔徑0.22um] 13.5*15cm(Millipore[分])Deoxycholic Acid 脫氧膽酸體液多巴(dopamine)比色法定量檢測試劑盒

    ISEQ00010/PVDF膜轉(zhuǎn)印膜[疏水膜,膜孔徑0.22um] 13.5*15cm(Millipore[分])Carboxymethyl chitosan 羧甲基殼聚糖  體液二氧化酶(DAO)活性比色法定量檢測試劑盒

    ISEQ00010/PVDF膜轉(zhuǎn)印膜[疏水膜,膜孔徑0.22um] 26.5cm*3.75m (Millipore)Carboxymethyl chitosan 羧甲基殼聚糖  體液二氧化酶(DAO)活性熒光定量檢測試劑盒

    ISEQ00010/PVDF膜轉(zhuǎn)印膜[疏水膜,膜孔徑0.22um] 26.5cm*3.75m (Millipore)Uniconazole 烯效唑體液二氧化碳(CO2)濃度酶偶聯(lián)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒

    無菌容器封口膜12*12Rotenone 魚藤酮體液非蛋白/游離巰基含量比色法定量檢測試劑盒
    SNU886細(xì)胞白分化抗原CD99(CD99)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human Syntaxin 2 ELISA KitHAUS3蛋白抗體

    巨噬炎性蛋白1β(MIP-1β)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human SYN1 ELISA Kit熱休克蛋白93抗體

    輔肌動蛋白α3(ACTN3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human SYN2 ELISA Kit磷酸化組蛋白去乙酰化酶3抗體

    10kDa干擾素γ誘導(dǎo)蛋白(IP-10/CXCL10)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human SYNGAP1 ELISA Kit組蛋白H2B抗體

    接觸蛋白3(CNTN3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human SYNJ1 ELISA Kit短鏈L-3羥烷基輔酶A脫氫酶抗體

    表皮活化肽因子(CAPF)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human Synaptogyrin-4 ELISA Kit組蛋白去乙酰化酶9抗體

    神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白2(NRG-2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Human Synaptogyrin 1 ELISA Kit組蛋白去乙酰化酶10抗體
    注意事項(xiàng):
         盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,但為取得良好的使用效果,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
         如果有細(xì)菌或真菌污染,會嚴(yán)重影響檢測效果。
         染色后宜盡快檢測,時(shí)間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
         如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗。
         熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進(jìn)行熒光觀察時(shí),盡量縮短觀察時(shí)間,同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
         用于流式細(xì)胞儀檢測時(shí),如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測,這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞。
         需自備PBS。
         本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
         為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

     


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