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    蟹特定基因序列PCR檢測試劑盒價格

    產(chǎn)品簡介

    斑激酶(FAK)ELISA試劑盒英文名稱:Human focal adhesion kinase,FAK ELISA Kit進口/原裝

    人鳥氨酸氨基甲酰轉移酶(OCT)ELISA試劑盒英文名稱:Human ornithine carbamoyl transferase,OCT ELISA Kit進口/原裝

    人鳥氨酸脫羧酶(ODC)ELISA試劑盒英文名稱:Human Ornithine dec

    更新時間:2021-03-13
    訪問次數(shù):558
    詳細介紹在線留言

    注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。

     產(chǎn)品名稱

     蟹特定基因序列PCR檢測試劑盒價格

     規(guī)格

     50T

     貨號

     LZP7841

    組成及試劑配制:
    1、酶標板:一塊(96孔)
    2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
    3、 樣品稀釋液:1×20ml。
    4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
    5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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    實驗過程:
    一、試劑準備
    1. DNA模板
    2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
    3.10×PCR Buffer
    4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
    5.Taq酶
    二、操作步驟
    1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
    dNTP mixl                 4μl
    引物1(10pM)               2μl
    引物2(10PM)              2μl
    Taq酶(2U/μl)            1μl
    DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
    ddH2O至               50 μl
    PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
    2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
    3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
    4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
    三、注意事項
    1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
    2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
    3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
    4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
    5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
    6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
    7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
    四甲基硫酸氫銨(離子色譜級,≥99.0%(T))PAK3 Antibody羥基磺酸鈉

    (LC-MS淋洗劑,≥99.5%(GC))PAK3 Antibody代叔丁烷

    四基溴化銨(離子對色譜級)PTMScan® Glutaryl-Lysine [Glut-K] Kit6,6'-二甲基-2,2'-聯(lián)吡啶

    四丁基化銨(離子對色譜級)PRAS40 Antibody二醋酸酯

    三辛(離子對試劑)Phospho-PRK1 (Thr774)/PRK2 (Thr816) Antibody5-甲基異噁唑-酰氨

    甲酸鈉(for HPLC,≥99.0%(NT))PRK2 Antibody4,5-二氨基-6-巰基嘧啶

    1-己烷磺酸鈉(離子對色譜級,>98.0%(T))HP1β Antibody2-溴酰

    高酸鈉,無水(for HPLC,99.0%)Pan-Calcineurin A Antibody氟磺酰基二甲酯

    四甲基溴化銨(離子對色譜級,≥99.0%(AT))PAK2 (C17A10) Rabbit mAb三氟

    三溴(光譜級,>99.0%(GC))PAK2 (C17A10) Rabbit mAb3,二

    草酸鈉容量分析用溶液標準物質(zhì)(0.05M)HP1α Antibody對甲氧基甲酸酯

    氫氧化鈉容量分析用標準溶液(0.0997mol/L)eIF4G (C65H5) Rabbit mAb三羥甲基氨烷馬來酸酯

    剛果紅(分析標準品,≥97.0%(HPLC))HP1γ Antibody(2S,5S)-2,5-己二

    正癸酸(分析標準品,≥99.5%(GC))Jagged1 (28H8) Rabbit mAb并[B]噻吩-酸

    異丁酸(分析標準品,>99.5%(GC))Jagged1 (28H8) Rabbit mAb2-(1H-吡唑-1-基)酸

    甲基反亞油酸甲酯(分析標準品)CD161/KLRB1 (HP-3G10) Mouse mAb (PerCP-Cy5.5® Conjuga)N-BOC-L-1,2,3,四氫異喹啉-羧酸

    肉豆蔻酸甲酯(分析標準品,≥99.5%(GC))JMJD1B/JHDM2B Antibody2-氨基-5-溴甲酰

    三聚(分析標準品,≥99.9%(HPLC))GST Antibody5-溴-2-氟三氟甲

    8異(8-iso-PG)ELISA試劑盒NEDD4L/NEDD4-2  泛素連接酶NEDD4-2100 ul

    8-異構F2α(8-epi-PGF2α)ELISA試劑盒Phospho-NEDD4L (Ser342)  酸化泛素連接酶NEDD4-2100 ul

    8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒NCoR2  核受體輔助抑制因子2100 ul

    8-羥基鳥嘌呤DNA糖苷酶(OGG1)ELISA試劑盒NEP/MME  金屬肽鏈內(nèi)切酶100 ul

    6酮F1a(6-keto-PGF1a)ELISA試劑盒NDRG1/Cap43  分化相關基因NDRG1100 ul

    6酮(6-K-PG)ELISA試劑盒Phospho-NDRG1 (Ser330)  酸化分化相關基因NDRG1100 ul

    6-羥多巴(6-OHDA)ELISA試劑盒Phospho-NDRG1 (Thr346)  酸化分化相關基因NDRG120 ul

    60S核糖體蛋白L36a-樣(RPL36AL)ELISA試劑盒NDRG2  抑癌基因NDRG2100 ul

    60S核糖體蛋白L17(RPL17)ELISA試劑盒NDRG3  抑癌基因NDRG3100 ul
    蟹特定基因序列PCR檢測試劑盒價格人黏膜地址素細胞黏附分子(MAdCAM-1)ELISA試劑盒英文名稱:Human mucosal addressin cell adhesion molecule-1,MAdCAM-1 ELISA Kit進口/原裝

    人黏著斑激酶(FAK)ELISA試劑盒英文名稱:Human focal adhesion kinase,FAK ELISA Kit進口/原裝

    人鳥氨酸氨基甲酰轉移酶(OCT)ELISA試劑盒英文名稱:Human ornithine carbamoyl transferase,OCT ELISA Kit進口/原裝

    人鳥氨酸脫羧酶(ODC)ELISA試劑盒英文名稱:Human Ornithine decarboxylase,ODC ELISA Kit進口/原裝

    人鳥苷酸交換因子(GEF)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Guanine Exchange Factor,GEF ELISA Kit*

    人鳥苷酸結合蛋白4(Gbp4)ELISA試劑盒英文名稱:human guanylate nucleotide binding protein 4,Gbp4 ELISA Kit*小鼠維生素B12(VB12)ELISA試劑盒      組裝/原裝

    小鼠維生素A(VA)ELISA試劑盒      組裝/原裝

    小鼠病毒(MVM)ELISA試劑盒      組裝/原裝

    小鼠網(wǎng)膜素(omein)ELISA試劑盒      組裝/原裝         
    檢測步驟:
    一、 試劑的準備
    從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
    設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
    試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
    熒光PCR反應液 14µL N×14µL
    酶混合物 1 µL N×1 µL
    總量 15 µL N×15µL
    1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
    7.2 qPCR反應條件
    將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內(nèi)。
    推薦循環(huán)條件:
    1循環(huán) 50℃ for 2 min
    預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
    PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
    60℃ for 60 sec
    60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

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