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    當(dāng)前位置:首頁(yè)  -  產(chǎn)品中心  -  科研抗體  -  一抗  -  0.2ml/200μg神經(jīng)酰胺激酶CERK抗體說明書

    神經(jīng)酰胺激酶CERK抗體說明書

    產(chǎn)品簡(jiǎn)介

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    更新時(shí)間:2021-08-02
    訪問次數(shù):557
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    我司提供以下列技術(shù)外包服務(wù):

    1.分子生物學(xué):質(zhì)粒抽提、PCR、Q-PCR、RT-PCR、分子生物學(xué):基因合成、引物合成、基因測(cè)序、載體構(gòu)建等

    2.蛋白工程:原核、哺乳動(dòng)物蛋白表達(dá)系統(tǒng)等

    3.病毒包裝:腺病毒、慢病毒等

    4.抗體工程:磁珠分選、病理染色、WB、ELISA、IP、IF、IHC、FACS、Confocal等等

    5.細(xì)胞工程:細(xì)胞表型分析(凋亡、增殖、周期、遷移、侵襲、修復(fù)、克隆形成)、細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞膜制備、穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建、細(xì)胞RNAi技術(shù)等等。

    Acylsphingosine kinase; Ceramide kinase; hCERK; KIAA1646; Lipid kinase 4; LK4. 
    英文名稱 Anti-CERK

    中文名稱  神經(jīng)酰胺激酶CERK抗體說明書    

    1mg/1ml

    規(guī) 0.2ml/200μg

    抗體來源 Rabbit

    克隆類型 polyclonal

    交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Cow, Horse, Rabbit

    產(chǎn)品類型 一抗

    研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 細(xì)胞周期蛋白 激酶和磷酸酶

    蛋白分子量 predicted molecular weight: 60kDa

    Lyophilized or Liquid

    KLH conjugated synthetic peptide derived from human CERK

    IgG

     

    圖片1.jpg 

    抗體制備過程:
    1.材料與試劑
     a.提取的動(dòng)物 Ig
     b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
     c.青霉素和鏈霉素
     d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
     e.其它材料及試劑
    2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
    3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
    4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
    5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
    6、純化出抗體。
    7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制圖片3.jpg

    抗體的鑒定:
    1)抗體的效價(jià)鑒定:不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價(jià)。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來鑒定。
    2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力。抗體的特異性高,它的識(shí)別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。 
    如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時(shí),表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。
    3)抗體親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫(kù)侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol。抗體親和力的測(cè)定對(duì)抗體的篩選,確定抗體的用途,驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義。
    實(shí)驗(yàn)原理 :
    1)產(chǎn)品僅用于科研特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁(yè)p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。 
    2)活補(bǔ)體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補(bǔ)體。 
    3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與免疫應(yīng)答。 
    4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)
    免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。 
    5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。 
    6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
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