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    HCA--8693細(xì)胞

    產(chǎn)品簡介

    HCA--8693細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:
    叉頭蛋白D4ILT2/CD85j/FITC 熒光素標(biāo)記表面免疫球蛋白樣轉(zhuǎn)錄因子2抗體IgG
    磷酸化細(xì)絲蛋白A抗體ILTV/FITC 熒光素標(biāo)記抗雞傳染性喉氣管炎病抗體IgG

    更新時間:2021-08-30
    訪問次數(shù):948
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    我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價,產(chǎn)品貨期短,價格優(yōu),售后齊全。

    產(chǎn)品名稱:盲腸腺癌細(xì)胞(未分化)
    英文簡稱:HCA--8693細(xì)胞

    貨號:LZ-X969477
    規(guī)格:T25
    生長特性:貼壁

    圖片2.jpg 

    凍存培養(yǎng)基:
    凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
    1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
    2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
    培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
    以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
    1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
    2.凍存貼壁細(xì)胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
    3.采用、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
    4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細(xì)胞沉淀。
    注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
    5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
    6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
    7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低  1°C。或者,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

    圖片2.jpg 

    實驗材料: 
    1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶 
    2. 100ml滅菌燒杯2個;
    3、50ml離心筒2個 
    4、滅菌培養(yǎng)皿1個,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 
    5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個 
    6、細(xì)胞計數(shù)板1塊; 
    7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把; 
    8、酒精燈1臺;

    實驗報告:
    一、分離與培養(yǎng):
       1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;
       2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
       3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
       4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
       5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
    二、免疫熒光鑒定:
       1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
       2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
       3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
       4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
       5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
       6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微
    鏡下觀察圖像并拍照。

    寬鱗大孔菌25-甲氧基-原人參三;25-OCH3Miller培養(yǎng)基克拉拉蛋白(Clara分泌蛋白)抗體

    短裙竹蓀東北變種3-O-甲基沒食子酸;3-O-Methy瓜氨酸環(huán)肽抗體

    金針菇5-甲基-7-甲氧基異黃酮;5-MethMT培養(yǎng)基調(diào)節(jié)活化的正常T表達(dá)和分泌的因子(趨化因子)

    長根菇5-甲基糠;5-Methylfurf巨噬炎性蛋白3α抗體

    大禿馬勃芥子堿硫酸鹽;SinapinethiNielsen培養(yǎng)基嗜酸粒趨化蛋白抗體

    木耳4-甲氧基;2-Hydroxy-4巨噬來源的趨化因子抗體

    橢圓釀酒酵母金松雙黃酮;SciadopitysinNitsch&Nitsch培養(yǎng)基淋巴趨化因子CCL21抗體

    橢圓釀酒酵母角鯊烯;Squalene嗜酸粒趨化蛋白3抗體

    橢圓釀酒酵母甲基原薯蕷皂苷;Methylprotod培養(yǎng)基表面趨化因子受體2/5抗體

    橢圓釀酒酵母6-姜烯酚;6-Shogaol木本植物用培養(yǎng)基(WPM)表面趨化因子受體2A抗體

    釀酒酵母10-姜酚;10-Gingerol表面趨化因子受體2B抗體

    釀酒酵母甲氧醉椒素;YangoninKC培養(yǎng)基表面趨化因子受體7抗體

    釀酒酵母甲基異茜草素-1-甲;RubiadiCXCL10趨化因子10/干擾素誘導(dǎo)蛋白10抗體

    釀酒酵母姜酮;ZingeroneNLN基本培養(yǎng)基(Lichter,1982)表面趨化因子受體8抗體

    釀酒酵母甲基蓮心堿;Neferine產(chǎn)品名稱表面趨化因子受體9抗體
    HCA--8693細(xì)胞纖連蛋白7抗體匙羹藤新苷元 2-Chloroethanesulfonic acid sodium salt

    彈性蛋白結(jié)合蛋白Fcn2抗體匙羹藤葉(標(biāo)準(zhǔn)品) 2'-Deoxyinosine-5'-monophosphate sodium salt

    范可尼綜合征相關(guān)蛋白FAN1抗體匙羹藤皂苷C(標(biāo)準(zhǔn)品) 2-Ethoxybenzaldehyde

    范可尼貧血組蛋白A抗體赤脛散(標(biāo)準(zhǔn)品) 2-Hydroxyacetophenone

    卷曲蛋白3抗體赤芍(川赤芍)(標(biāo)準(zhǔn)品) 2-Isopropylimidazole

    分裂周期樣蛋白20抗體赤芍(標(biāo)準(zhǔn)品) 2-NAA, 2-Naphthaleneacetic acid

    鐵氧化還原蛋白還原酶抗體蟲草素(標(biāo)準(zhǔn)品) 2-Naphthaldehyde

    磷化性成纖維生長因子受體1抗體臭靈丹(標(biāo)準(zhǔn)品) 2-Naphthyl acetate

    精結(jié)合蛋白17抗體臭梧桐葉(標(biāo)準(zhǔn)品) 3,4,5-Trimethoxycinnamic acid
    注意事項:
         盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,但為取得良好的使用效果,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
         如果有細(xì)菌或真菌污染,會嚴(yán)重影響檢測效果。
         染色后宜盡快檢測,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
         如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗。
         熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進(jìn)行熒光觀察時,盡量縮短觀察時間,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
         用于流式細(xì)胞儀檢測時,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測,這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞。
         需自備PBS。
         本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
         為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

     


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