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技術(shù)文章

TECHNICAL ARTICLES

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  • 20223-29
    牛巨細(xì)胞病毒探針法熒光定量PCR試劑盒實驗操作

    牛巨細(xì)胞病毒探針法熒光定量PCR試劑盒實驗操作:1.模板制備(樣本制備區(qū))建議使用配套水生動物病害基因組DNA/RNA提取試劑盒系列產(chǎn)品,具體過程詳見產(chǎn)品說明書。2.添加模板(模板添加區(qū),放置于冰盒中進(jìn)行)請于-20℃條件下保存,有效期12個月取出所需測試數(shù)的已含有反應(yīng)液A-TSV-I的PCR管,將試劑*解凍,離心30秒,在管蓋上標(biāo)記管名(陰性對照管NG、樣品XX、陽性對照管PG)。打開管蓋向各管管底分別加入0.8μLB-I及0.2μLR-I,蓋上陰性對照管管蓋,其他各管分別...

  • 20223-24
    核糖體蛋白S6激酶1抗體的制備過程

    核糖體蛋白S6激酶1抗體的制備過程:1.免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。2.免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。3.免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家...

  • 20223-22
    保加利亞乳桿菌操作流程

    保加利亞乳桿菌操作流程:菌株復(fù)蘇:(按三區(qū)劃線法將留菌管內(nèi)的原始菌株進(jìn)行復(fù)蘇)1)所有菌株,顯色培養(yǎng)基分4區(qū),每區(qū)一株,標(biāo)明菌株號、菌種名常用縮寫如下:cal:白念珠菌cgl:光滑念珠菌cpa:近平滑念珠菌ctr:熱帶念珠菌ckr:克柔念珠菌cne:新型隱球菌,其他菌種標(biāo)記全名。2)隱球菌除傳顯色培養(yǎng)基以外,另傳1/2塊血平皿上述菌株統(tǒng)一37oC孵育48h菌種鑒定:(48h后觀察結(jié)果)。簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)...

  • 20223-17
    狼源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒?檢測方法步驟

    狼源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒檢測方法步驟:(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。其中步驟(1...

  • 20223-15
    人新喋呤(NEOP)ELISA試劑盒操作步驟

    人新喋呤(NEOP)ELISA試劑盒操作步驟:1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干...

  • 20223-9
    熒光定量PCR試劑盒在哪些領(lǐng)域可開展實踐?

    熒光定量PCR技術(shù)及熒光定量PCR試劑盒的出現(xiàn),大大簡化了定量檢測的過程,而且真正實現(xiàn)了絕對定量。多種檢測系統(tǒng)的出現(xiàn),使實驗的選擇性更強(qiáng)。自動化操作提高了工作效率,反應(yīng)快速、重復(fù)性好、靈敏度高、特異性強(qiáng)、結(jié)果清晰。隨著生物芯片技術(shù)和熒光探針定量技術(shù)的結(jié)合,熒光定量PCR在醫(yī)學(xué)檢測及其他各個領(lǐng)域中的應(yīng)用前景將更加廣闊。盡管如此我們也應(yīng)清晰認(rèn)識到,F(xiàn)Q-PCR技術(shù)在我國各個研究領(lǐng)域的應(yīng)用并不多見,這就需要我們更充分地推廣該技術(shù),以推動研究工作的快速發(fā)展。熒光定量PCR技術(shù)是通過熒...

  • 20223-3
    大鼠琥珀酸;丁二酸ELISA檢測試劑盒樣本處理及要求

    大鼠琥珀酸;丁二酸ELISA檢測試劑盒樣本處理及要求1.血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。2.血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3.組織勻漿:用預(yù)冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中...

  • 20223-1
    細(xì)菌專用蛋白酶抑制劑混合液反應(yīng)五要素

    細(xì)菌專用蛋白酶抑制劑混合液反應(yīng)五要素:參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:①引物長度:15-30bp,常用為20bp左右。②引物擴(kuò)增跨度:以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。③引物堿基:G+C含...

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